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chendarid0銀蟲 (初入文壇)
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[交流]
【求助/交流】提血液RNA濃度很低，怎樣使其濃度高從而用于反轉(zhuǎn)錄 已有8人參與
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請高手出手相救啊 提取血液RNA的濃度很低，用于下面的20ul反轉(zhuǎn)錄體系（最大的rna量不能超過1ug），我是900ng的rna來反轉(zhuǎn)錄，提取rna濃度太低，加入的rna體積會超過20ul體系，怎么辦。 我也嘗試過將2管獲得的血液組織合并成一管，離心去上清，取下面的（應(yīng)該含有很多血細胞），然后加1ml trizol提取rna，可是還是很低。 如果血液不離心的話那么我們用的一般的ep管里就盛不下1mltrizol和血液了，那如果血液很多，trizol很少（小于1ul）的話可能也提不好吧。 可不可以找一個大一點的ep管，然后將幾管的血液合并在這個管子里，然后再加適量trizol來提取rna。 請各位高手哥哥姐姐指點一二，小弟不盡感激。 |
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小木蟲(金幣+0.5):給個紅包，謝謝回帖交流
dhd997(金幣+2):謝謝交流 2010-12-21 08:29:00
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| 你提的是全血RNA?可是一般的都是替PBMC或白細胞的RNA啊。要是這樣的話，你可以把紅細胞裂解以后將白細胞收集到一個EP管中再提，Trizol的量不能太少，否則會影響RNA的提取效率的。如果是提取血漿中的病毒RNA，那你可以將血漿或血清單分出來再提啊。另外，象樓上所說，不要太計較總量的，因為還有反轉(zhuǎn)錄的步驟，所得產(chǎn)物足夠你用了，還有就是找一個較高轉(zhuǎn)錄效率的反轉(zhuǎn)錄酶也就OK了 |
9樓2010-12-20 19:38:35
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10樓2010-12-20 21:45:16
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