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【求助/交流】SDS-PAGE凝膠電泳膠的詳細制備方法
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brightfuture01
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rainwander(金幣+2):鼓勵積極參與~~~ 2010-12-29 17:35:12
August893(金幣+1): 2011-03-30 15:13:26
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August893(金幣+1): 2011-03-30 15:13:26
 ，看看汪家政的 蛋白質(zhì)技術(shù)手冊吧，免費的。http://ishare.iask.sina.com.cn/f/7521954.html |
2樓2010-12-29 11:16:55
August893(金幣+1): 2011-03-30 15:13:30
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3樓2010-12-29 11:32:06
4樓2011-01-14 22:00:07
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rainwander(金幣+3):鼓勵積極參與交流~~~ 2011-01-15 22:07:56
rainwander(金幣+3):鼓勵積極參與交流~~~ 2011-01-15 22:07:56
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個人覺得那本書有點兒老了，過時了 以下是我個人查資料得出的，也是自己做實驗要用的。可以參考一下，不過我覺得你還是要多查文獻，與你要做內(nèi)容相關(guān)的文獻，還是很有用的。 (1) 30%丙烯酰胺（Acr）溶液：稱Acr 30g，甲叉雙丙烯酰胺（Bis）0.8g，加純水至100mL 4℃棕色瓶保存（1-2個月） (2) 10%十二烷基硫酸鈉（SDS）溶液：稱SDS 10g，加純水至100mL，室溫保存 (3) 10%過硫酸銨(AP)溶液：稱AP 1g，加純水至10mL，-20℃保存 (4) 1.5mol/L pH8.8 Tris-HCl緩沖液：稱取Tris 181.71g，加入800mL水，用1mol/L鹽酸調(diào)pH8.8， 最后定容至1L (5) 0.5mol/L pH6.8 Tris-HCl緩沖液：稱取Tris12.1g，加入150mL水，用1mol/L鹽酸調(diào)pH6.8， 最后用蒸餾水定容至200mL (6) 1.0mol/L pH6.8 Tris-HCl緩沖液：稱取Tris12.1g，加入50mL水，用1mol/L鹽酸調(diào)pH6.8， 最后用蒸餾水定容至100mL。 (7) TEMED：N,N,N',N'-四甲基乙二胺； DTT：二硫蘇糖醇（DTT和巰基乙醇相比，作用相似，但DTT的刺激性氣味要小很多，毒性也比巰基乙醇低很多。而且DTT比巰基乙醇的濃度低7倍時，兩者效果相近，但DTT價格略高一些。由于容易被空氣氧化，因此DTT的穩(wěn)定性較差；但冷凍保存或在惰性氣體中處理能夠延長它的使用壽命） (8) 12%變性聚丙烯酰胺凝膠溶液：現(xiàn)用現(xiàn)配 試劑組成 100mL 30%丙烯酰胺（mL） 40 Tris-HCL 1.5M pH8.8（mL） 25 10% SDS（mL） 1 超純水（mL） 33 TEMED（μL） 40 10%過硫酸銨（mL） 1 (9) 4%變性聚丙烯酰胺凝膠溶液：現(xiàn)用現(xiàn)配 試劑組成 5mL 30%丙烯酰胺（mL） 0.67 Tris-HCL 0.5M pH6.8（mL） 0.63 10% SDS（mL） 0.05 超純水（mL） 3.6 TEMED（μL） 5 10%過硫酸銨（mL） 0.05 (10) 5*上樣緩沖液：4℃保存 試劑組成 10mL Tris-HCL 1.0M pH6.8（mL） 2.5 甘油（mL） 5 SDS（g） 1 超純水（mL） 溴酚藍 痕量 (10)10*電極緩沖液： 試劑組成 1L 甘氨酸（g） 2.5 Tris（g） 5 SDS（g） 1 超純水（mL） 室溫保存，使用時取100 mL，另加10 mL 10% SDS定容至1L，可重復(fù)用3-5次 |
5樓2011-01-15 19:08:41
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