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【求助/交流】求高手指點(diǎn)!關(guān)于用C43(DE3)表達(dá)膜蛋白 已有4人參與
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基因組信息顯示我的目標(biāo)蛋白為膜蛋白,371aa,稀有密碼子有5個,不相連,通過結(jié)構(gòu)分析也證明存在跨膜結(jié)構(gòu),最初用pET28a作為表達(dá)載體在BL21中表達(dá),都是包涵體,后來把宿主換成C43(DE3),超聲破碎后很渾濁,顯微鏡下看細(xì)胞是破碎的,蛋白電泳結(jié)果全都是包涵體,誘導(dǎo)條件也改過,沒效果~~ 現(xiàn)在換pGEX-4T-1作表達(dá)載體,也不知道結(jié)果會怎樣~~ 各位有沒有遇到過這么情況,求指點(diǎn),萬分感謝~~ [ Last edited by fiona_ on 2011-1-6 at 15:58 ] |
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