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[交流]
【求助】加了三乙胺的流動(dòng)相
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問(wèn)2個(gè)問(wèn)題，所以給了較多的分哈，我做HPLC的流動(dòng)相是甲醇：水=20:80加了0.05%的三乙胺，問(wèn)一，加了三乙胺需要用大量的水沖洗平衡柱子嗎？（三乙胺是液態(tài)的，不用95%的水沖平衡過(guò)渡，液態(tài)的不會(huì)有析出損害柱子吧）。問(wèn)二，加了三乙胺的流動(dòng)相好像不穩(wěn)定，上了樣后大概10多分鐘就會(huì)出現(xiàn)基線往下走，但沒(méi)有上樣時(shí)的基線又是平衡的，不知道是怎么回事，我覺(jué)得是三乙胺的影響，原來(lái)沒(méi)有加三乙胺時(shí)都沒(méi)有出現(xiàn)這種情況，請(qǐng)問(wèn)怎么保持上樣后的基線穩(wěn)定呢？ 描述的有點(diǎn)多，謝謝大家！��！ |
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2樓2011-01-18 23:09:22
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terry890(金幣+3):謝謝參與
novus(金幣+1): 謝謝交流，PS：從樓主色譜條件看應(yīng)該是走等度的方法哦。 2011-01-19 15:01:29
terry890(金幣+3):謝謝參與
novus(金幣+1): 謝謝交流，PS：從樓主色譜條件看應(yīng)該是走等度的方法哦。 2011-01-19 15:01:29
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首先我想說(shuō)的是，加入0.05%的三乙胺后，流動(dòng)相是呈強(qiáng)堿性的，最好是測(cè)一下流動(dòng)相的ph值，看一下色譜柱時(shí)候能夠耐受該ph值，還有關(guān)于平衡的問(wèn)題，最好是從同等比例的水過(guò)度到同樣比例的鹽，這樣對(duì)色譜柱的壽命會(huì)長(zhǎng)一點(diǎn)。 還有你應(yīng)該是用梯度洗脫吧，這樣隨著梯度進(jìn)行，基線會(huì)波動(dòng)的，這是很正常的，而且你的波長(zhǎng)才234nm，所以波動(dòng)會(huì)比較大。 |
3樓2011-01-18 23:27:39
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4樓2011-01-18 23:33:50
5樓2011-01-19 00:02:17
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7樓2011-01-19 08:14:44
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11樓2011-01-19 12:53:56
novus: 淡定~淡定！ 建議樓主將樣品用流動(dòng)相去溶解，如果基線平衡好了以后再走樣品依然有波動(dòng)（負(fù)吸收）的話，可以更換別的波長(zhǎng)試一下，或者調(diào)整一下檢測(cè)器的參比波長(zhǎng)。 2011-01-20 12:09:34
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回答的幾乎都沒(méi)有用，我寫(xiě)的很清楚呀，沒(méi)有用梯度，用的是 甲醇：水=20:80，�。�！ 關(guān)于PH值的問(wèn)題我測(cè)過(guò)流動(dòng)相PH值為8，在柱子的酸堿范圍��！，還有平衡的問(wèn)題我也平衡了的�。�！平衡了1個(gè)小時(shí)��！基線都是平衡的沒(méi)有波動(dòng)��！就是上了樣就波動(dòng)了��！到底是怎么回事呀？？麻煩了��！ |
12樓2011-01-20 11:03:16
13樓2011-01-20 17:12:31
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小木蟲(chóng)(金幣+0.5):給個(gè)紅包，謝謝回帖交流
karl2100(金幣+1): 謝謝回帖！ 2011-01-25 12:22:31
小木蟲(chóng)(金幣+0.5):給個(gè)紅包，謝謝回帖交流
karl2100(金幣+1): 謝謝回帖！ 2011-01-25 12:22:31
| 你說(shuō)的十幾分鐘基線向下，是15-17min的嗎？如果是的，那在我看來(lái)不是基線向下反而是出現(xiàn)倒峰了。你說(shuō)空走不會(huì)出現(xiàn)，進(jìn)樣就會(huì)出現(xiàn)，不知你進(jìn)過(guò)流動(dòng)相和溶劑沒(méi)，如果沒(méi)有就試試，如果你的溶劑中有甲醇，那就是溶劑的倒峰的可能就更大了，我有個(gè)項(xiàng)目就是甲醇會(huì)出倒峰。 |
14樓2011-01-24 15:24:27
15樓2011-01-24 19:43:07
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16樓2011-01-26 15:04:13
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