nancy1984

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[交流] 【求助】pH=3磷酸緩沖液配置，怎樣加入三乙胺？

請教下各位：
計劃配置0.08M, pH=3的PBS緩沖液0.6L為流動相
要加入0.5%的三乙胺，即3mL.
我計劃是配置先稱量一定質(zhì)量的磷酸二氫鈉水合液后配置0.6L 0.08M的磷酸二氫鈉溶液，再加入3mL三乙胺，最后用磷酸調(diào)節(jié)至pH=3。
1.這個配置順序?qū)Σ粚?br /> 2.購買三乙胺是用一般化學純還是買HPLC級的呢？一般三乙胺是用來抑制拖尾封的，用量能減少嗎？
3. 我分析時間在一個白天內(nèi)，可否不加入抑制細菌試劑呢？

多謝啦~

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1樓 2011-02-10 10:01:31

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cpuyxj

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nancy1984(金幣+2): 謝謝交流 2011-02-10 10:28:36

1、順序?qū)Φ难?br /> 2、分析純就可
3、不用加抑菌試劑，第二天重新配就是了

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2樓2011-02-10 10:23:29

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xx小小xx

木蟲 (著名寫手)

nancy1984(金幣+2): 謝謝交流 2011-02-10 11:20:43

你這樣配出來的濃度并不準確
用將磷酸二氫鈉調(diào)節(jié)至pH=3要加入大量的磷酸，因此實際濃度會大很多
另外，三乙胺也是比較強的堿，會消耗較多的鹽酸

配酸性較強的磷酸鹽緩沖液應(yīng)該反過來，先配磷酸溶液，再用濃度比較大的磷酸和NaOH（大概1M）

如果要很準確的控制濃度，就得麻煩點，先分別配0.08M的磷酸和0.08M的磷酸二氫鈉若干mL（分別都要加0.5%的三乙胺），然后按一定比例混合

另外，個人認為三乙胺加0.5%多了，我們一般只加0.1%的樣子

[ Last edited by xx小小xx on 2011-2-10 at 11:05 ]

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3樓2011-02-10 11:03:33

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nancy1984

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引用回帖:

Originally posted by xx小小xx at 2011-02-10 12:03:33:
你這樣配出來的濃度并不準確
用將磷酸二氫鈉調(diào)節(jié)至pH=3要加入大量的磷酸，因此實際濃度會大很多
另外，三乙胺也是比較強的堿，會消耗較多的鹽酸

配酸性較強的磷酸鹽緩沖液應(yīng)該反過來，先配磷酸溶液，再用濃度 ...

非常感謝你的建議。

請問這句話怎么理解�。�

配酸性較強的磷酸鹽緩沖液應(yīng)該反過來，先配磷酸溶液，再用濃度比較大的磷酸和NaOH（大概1M）

是指先配置好0.08M的磷酸溶液0.6L，加入三乙胺后(0.1%)，再加入然后再用NaOH(1M)調(diào)節(jié)至pH=3嗎？

我查了下，選用0.1%三乙胺也可以的。

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4樓2011-02-10 11:24:40

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xx小小xx

木蟲 (著名寫手)

nancy1984(金幣+3): 非常感謝 2011-02-10 13:16:25

剛才打字的時候掉字了
基本上就是你理解的

就一般試樣來說，鹽濃度影響不大（生物活性物質(zhì)和表面活性劑另當別論），pH也不一定要非常精確，只要每次用的一樣就可以有重復(fù)性
所以我的習慣是計算各組成的用量，然后直接配置，很少用pH計調(diào)節(jié)
當然，個人做法不同，只要達到要求就可以了

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5樓2011-02-10 12:03:13

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HotG

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nancy1984(金幣+1): 謝謝交流~~ 2011-02-12 15:09:43

引用回帖:

Originally posted by xx小小xx at 2011-02-10 12:03:13:
剛才打字的時候掉字了
基本上就是你理解的

就一般試樣來說，鹽濃度影響不大（生物活性物質(zhì)和表面活性劑另當別論），pH也不一定要非常精確，只要每次用的一樣就可以有重復(fù)性
所以我的習慣是計算各組成的用量， ...

不用pH計怎么知道數(shù)值呢

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6樓2011-02-10 15:17:01

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xx小小xx

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nancy1984(金幣+1): 謝謝交流~ 2011-02-12 15:09:55

引用回帖:

Originally posted by HotG at 2011-02-10 15:17:01:

不用pH計怎么知道數(shù)值呢

根據(jù)平衡常數(shù)算，磷酸鹽有現(xiàn)成的表可查
計算的誤差一般可控制在0.1pH上下，而且重現(xiàn)性一般高于用pH計調(diào)節(jié)

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7樓2011-02-10 17:38:49

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HotG

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引用回帖:

Originally posted by xx小小xx at 2011-02-10 17:38:49:

根據(jù)平衡常數(shù)算，磷酸鹽有現(xiàn)成的表可查
計算的誤差一般可控制在0.1pH上下，而且重現(xiàn)性一般高于用pH計調(diào)節(jié)

哦是這樣啊好的最近實驗時試試

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8樓2011-02-11 10:06:12

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nancy1984(金幣+1): 謝謝交流~ 2011-02-12 15:10:06

引用回帖:

Originally posted by HotG at 2011-02-11 10:06:12:

哦是這樣啊好的最近實驗時試試

算的時候一定記著要把三乙胺的量也算進去

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9樓2011-02-11 12:52:53

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