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【分享】怎樣選擇離子交換填料
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離子交換填料的選擇依據(jù) 離子交換填料的種類很多，離子交換層析要取得較好的效果首先要選擇合適的離子交換填料。 首先是對(duì)離子交換填料電荷基團(tuán)的選擇，確定是選擇陽(yáng)離子交換填料還是選擇陰離子交換填料。這要取決于被分離的物質(zhì)在其穩(wěn)定的pH 下所帶的電荷，如果帶正電，則選擇陽(yáng)離子交換填料；如帶負(fù)電，離子交換填料則選擇陰離子交換填料。例如待分離的蛋白等電點(diǎn)為4，穩(wěn)定的pH 范圍為6－9，由于這時(shí)蛋白帶負(fù)電，故應(yīng)選擇陰離子交換填料進(jìn)行分離。強(qiáng)酸或強(qiáng)堿型離子交換填料適用的pH 范圍廣，常用于分離一些小分子物質(zhì)或在極端pH 下的分離。由于弱酸型或弱堿型離子交換填料不易使蛋白質(zhì)失活，故一般分離蛋白質(zhì)等大分子物質(zhì)常用弱酸型或弱堿型離子交換填料。 其次是對(duì)離子交換填料基質(zhì)的選擇。前面已經(jīng)介紹了，聚苯乙烯離子交換填料等疏水性較強(qiáng)的離子交換填料一般常用于分離小分子物質(zhì)，如無(wú)機(jī)離子、氨基酸、核苷酸等。而纖維素、葡聚糖、瓊脂糖等離子交換填料親水性較強(qiáng)，適合于分離蛋白質(zhì)等大分子物質(zhì)。一般纖維素離子交換填料價(jià)格較低，但分辨率和穩(wěn)定性都較低，適于初步分離和大量制備。葡聚糖離子交換填料的分辨率和價(jià)格適中，但受外界影響較大，體積可能隨離子強(qiáng)度和pH 變化有較大改變，影響分辨率。瓊脂糖離子交換填料機(jī)械穩(wěn)定性較好，分辨率也較高，但價(jià)格較貴。 另外離子交換填料顆粒大小也會(huì)影響分離的效果。離子交換填料顆粒一般呈球形，顆粒的大小通常以目數(shù)(mesh)或者顆粒直徑(mm)來(lái)表示，目數(shù)越大表示直徑越小。前面在介紹交換容量時(shí)提到了一些關(guān)于交換劑顆粒大小、孔隙的選擇。另外離子交換層析柱的分辨率和流速也都與所用的離子交換填料顆粒大小有關(guān)。一般來(lái)說(shuō)顆粒小，分辨率高，但平衡離子的平衡時(shí)間長(zhǎng)，流速慢；顆粒大則相反。所以大顆粒的離子交換填料適合于對(duì)分辨率要求不高的大規(guī)模制備性分離，而小顆粒的離子交換填料適于需要高分辨率的分析或分離。 這里特別要提到的是，離子交換纖維素目前種類很多，其中以DEAE-纖維素(二乙基氨基纖維素)和CM-纖維素(羧甲基纖維素)最常用，它們?cè)谏锎蠓肿游镔|(zhì)(蛋白質(zhì)，酶，核酸等)的分離方面顯示很大的優(yōu)越性。一是它具有開(kāi)放性長(zhǎng)鏈和松散的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，有較大的表面積，大分子可自由通過(guò)，使它的實(shí)際交換容量要比離子交換樹(shù)脂大的多；二是它具有親水性，對(duì)蛋白質(zhì)等生物大分子物質(zhì)吸附的不太牢，用較溫和的洗脫條件就可達(dá)到分離的目的，因此不致引起生物大分子物質(zhì)的變性和失活。三是它的回收率高。所以離子交換纖維素已成為非常重要的一類離子交換填料。 希望對(duì)您有幫助。  |
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dhd997
榮譽(yù)版主 (文壇精英)
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- 蟲號(hào): 500412
4樓2011-02-16 14:54:25
★ ★ ★
henghuibio(金幣+1):謝謝參與
dhd997(金幣+2): 熱心 2011-02-15 18:49:46
henghuibio(金幣+1):謝謝參與
dhd997(金幣+2): 熱心 2011-02-15 18:49:46
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對(duì)離子樹(shù)脂填料的選擇，可以在以下連接中下載各種填料說(shuō)明書看看 上海生工有各種樹(shù)脂填料賣 產(chǎn)品編號(hào)SF001 SF002 SF003 SF004 SF.......... http://www.sangon.com/sqltest2.a ... =%20Fcode%20like%20'%25sf%' [ Last edited by xhjggl on 2011-2-16 at 16:21 ] |
2樓2011-02-15 18:49:27
5樓2011-03-30 11:53:14
★
henghuibio(金幣+1): 謝謝參與
送紅花一朵
henghuibio(金幣+1): 謝謝參與
送紅花一朵 |
可以問(wèn)幾個(gè)問(wèn)題嗎？ 1.優(yōu)越性那里，說(shuō)纖維素較樹(shù)脂有開(kāi)放性長(zhǎng)鏈和松散的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，開(kāi)放性長(zhǎng)鏈優(yōu)越在哪里？網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)又具體優(yōu)越在哪里ne？ 2.回收率高，回收率大概是多少哩？ 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
7樓2015-10-29 23:46:18
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