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[求助] 【求助/交流】PCR產(chǎn)物切膠回收，總是有一條雜帶的大小是目的片段的兩倍大小

PCR產(chǎn)物切膠回收，總是有一條雜帶的大小是目的片段的兩倍大小，有沒有人遇到同樣的問題？有沒有人知道是什么原因！

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1樓 2011-03-09 22:25:16

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翱宇

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實驗會有很多怪現(xiàn)象，建議樓主還是配置濃度高的膠，重新跑吧，切割真正的目的條帶再說！

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2樓2011-03-09 22:35:45

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susizheng

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xiaoyu1014126(金幣+1): 微生物分子實驗確實很多現(xiàn)象無法解釋無法理解 2011-03-10 09:44:51

遇到過這種問題，可能是試劑盒輕度污染造成了，特別是實驗室很多人做實驗，共用Kit的情況下。如果雜帶比較淡，不影響后續(xù)實驗。

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Thank-you，so-blue.

3樓2011-03-10 08:58:34

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wuw579

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又或者是你可以在回收之前的電泳時間長些產(chǎn)物跑的開一些

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4樓2011-03-12 19:10:22

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rainwander

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試劑盒污染的可能性比較大

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千萬不要因為走的太久，而忘記了我們?yōu)槭裁闯霭l(fā)~~~~~~ForDream~~~~~~

5樓2011-03-12 19:28:50

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sandisk411

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可能是解鏈了。

我們曾測序，這樣的片段確是目的條帶的。
很有可能是割膠后融膠溫度或時間足夠長，導致DNA雙鏈解鏈了。

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6樓2011-03-13 15:14:05

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chenshuai1238

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引用回帖:

Originally posted by susizheng at 2011-03-10 08:58:34:
遇到過這種問題，可能是試劑盒輕度污染造成了，特別是實驗室很多人做實驗，共用Kit的情況下。如果雜帶比較淡，不影響后續(xù)實驗。

PCR膠回收才用試劑盒，我想樓主說的是在紫外下看膠的時候出現(xiàn)了一條雜帶。靜候大俠指教。

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7樓2011-03-13 19:43:18

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smiled001

禁蟲 (小有名氣)

本帖內(nèi)容被屏蔽

8樓2011-03-13 20:05:28

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神仙灣的鷹

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★
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖

引用回帖:

8樓: Originally posted by smiled001 at 2011-03-13 20:05:28
我也試過出現(xiàn)這種情況
DNA雙鏈解鏈的可能性感覺挺大的

你好我做的是融合PCR 融合后做完切膠回收還是有雜帶我溶膠時時60℃ 7min 然后混勻。我想問問你的有雜帶問題是怎么解決的啊謝謝了

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9樓2014-03-13 11:20:49

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