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湖畔狂想金蟲 (小有名氣)
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[求助]
求助：酶切下來的片段比PCR片段大100多bp是怎么回事，怎么解決這個問題。 已有3人參與
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我用的載體是寶生物 PMD 18-T SIMPLE VECTOR. 酶切的酶是Promega的。 PCR時，片段的位置很準確，但是和載體連完再切時，就發(fā)現(xiàn)切下來的片段比PCR時的大了100多。 一開始懷疑是點樣的問題，于是換了1管溴酚藍，結果仍偏大。 換用6X LOADING BUFFER ,結果略好一點點，比用溴酚藍時小了一點，但是由于我的目的片段是693和795，即使用了6X LOADING BUFFER酶切條帶仍在750mark上面。 有沒有哪位前輩遇到過這種問題，求指教。 |
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lvbobo823
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