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湖畔狂想金蟲 (小有名氣)
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[求助]
求助：酶切下來的片段比PCR片段大100多bp是怎么回事，怎么解決這個(gè)問題。 已有3人參與
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我用的載體是寶生物 PMD 18-T SIMPLE VECTOR. 酶切的酶是Promega的。 PCR時(shí)，片段的位置很準(zhǔn)確，但是和載體連完再切時(shí)，就發(fā)現(xiàn)切下來的片段比PCR時(shí)的大了100多。 一開始懷疑是點(diǎn)樣的問題，于是換了1管溴酚藍(lán)，結(jié)果仍偏大。 換用6X LOADING BUFFER ,結(jié)果略好一點(diǎn)點(diǎn)，比用溴酚藍(lán)時(shí)小了一點(diǎn)，但是由于我的目的片段是693和795，即使用了6X LOADING BUFFER酶切條帶仍在750mark上面。 有沒有哪位前輩遇到過這種問題，求指教。 |
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5樓2014-01-14 10:44:33
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