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湖畔狂想金蟲 (小有名氣)
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[求助]
求助:酶切下來的片段比PCR片段大100多bp是怎么回事,怎么解決這個問題。 已有3人參與
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我用的載體是寶生物 PMD 18-T SIMPLE VECTOR. 酶切的酶是Promega的。 PCR時,片段的位置很準(zhǔn)確,但是和載體連完再切時,就發(fā)現(xiàn)切下來的片段比PCR時的大了100多。 一開始懷疑是點(diǎn)樣的問題,于是換了1管溴酚藍(lán),結(jié)果仍偏大。 換用6X LOADING BUFFER ,結(jié)果略好一點(diǎn)點(diǎn),比用溴酚藍(lán)時小了一點(diǎn),但是由于我的目的片段是693和795,即使用了6X LOADING BUFFER酶切條帶仍在750mark上面。 有沒有哪位前輩遇到過這種問題,求指教。 |
鐵桿木蟲 (職業(yè)作家)
鐵桿木蟲 (正式寫手)

金蟲 (小有名氣)
金蟲 (小有名氣)
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