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惹待風(fēng)暴新蟲 (初入文壇)
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[交流]
【求助/交流】Km值測(cè)定,Vm怎么換算? 已有5人參與
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要測(cè)定酶的Km值,縱坐標(biāo)的Vmax怎么換算,只能測(cè)酶活力,怎么換算成反應(yīng)速率呢? 比如我用酪蛋白為底物,測(cè)得的A280為0.2,換算成酶活力后怎么再換算成反應(yīng)速率? |
銀蟲 (小有名氣)

木蟲 (著名寫手)

新蟲 (初入文壇)
| 你先做一條水解產(chǎn)物濃度與吸光度間的標(biāo)準(zhǔn)曲線,從標(biāo)準(zhǔn)曲線上就可以得出特定的A280所對(duì)應(yīng)的水解產(chǎn)物濃度,然后用這個(gè)濃度除以酶孵化反應(yīng)的時(shí)間就得到速度,根據(jù)這個(gè)由米式方程變換得來的公式:1/V=Km/Vm*1/[s]+1/[Vm],配一系列不同底物濃度來孵化反應(yīng),然后去測(cè)吸光度,從而得出V,再用1/V對(duì)1/[s]作圖,通過所得的斜率與截距,就可以得出Km和Vm了 |
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