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[交流]
【求助/交流】Km值測定，Vm怎么換算？ 已有5人參與
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要測定酶的Km值，縱坐標(biāo)的Vmax怎么換算，只能測酶活力，怎么換算成反應(yīng)速率呢？ 比如我用酪蛋白為底物，測得的A280為0.2，換算成酶活力后怎么再換算成反應(yīng)速率？ |
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silicare(金幣+5): 鼓勵新蟲參與 2011-03-14 12:31:25
silicare(金幣+5): 鼓勵新蟲參與 2011-03-14 12:31:25
| 你先做一條水解產(chǎn)物濃度與吸光度間的標(biāo)準(zhǔn)曲線，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上就可以得出特定的A280所對應(yīng)的水解產(chǎn)物濃度，然后用這個濃度除以酶孵化反應(yīng)的時間就得到速度，根據(jù)這個由米式方程變換得來的公式：1/V=Km/Vm*1/[s]+1/[Vm]，配一系列不同底物濃度來孵化反應(yīng)，然后去測吸光度，從而得出V，再用1/V對1/[s]作圖，通過所得的斜率與截距，就可以得出Km和Vm了 |
5樓2011-03-13 22:44:19
sofili
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2樓2011-03-12 10:24:17
lizhijiang
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3樓2011-03-12 14:00:14
4樓2011-03-12 20:55:00
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