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[交流] 【求助】【求助】請(qǐng)問：用細(xì)胞進(jìn)行含藥血清的體外藥效評(píng)價(jià)，應(yīng)該選用共培養(yǎng)，還是預(yù)培

各位好，我們正在進(jìn)行一個(gè)關(guān)于“血清藥理學(xué)”的實(shí)驗(yàn)，用細(xì)胞評(píng)價(jià)含藥血清的體外藥效。我們以H2O2為模型藥，想建立氧化損傷模型，從而考察藥物的抗氧化損傷作用。在我們的實(shí)驗(yàn)中我們將H2O2與含藥血清同時(shí)作用于細(xì)胞，結(jié)果發(fā)現(xiàn)空白血清本身具有很強(qiáng)的抗氧化性(即清除H2O2的作用)，使我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn)假陽(yáng)性(所有實(shí)驗(yàn)組的細(xì)胞的存活率都顯著提高，并且存活率幾乎都在同一個(gè)水平)，很明顯細(xì)胞存活率升高可能并不是藥物發(fā)揮的抗氧化作用，而是血清本身具有的抗氧化作用，所以它們的水平很一致。

為了探討血清的抗氧化作用，我們做過這樣一個(gè)實(shí)驗(yàn)：細(xì)胞培養(yǎng)48h后，分別設(shè)空白對(duì)照組，a系列H2O2組(設(shè)5個(gè)損傷濃度600,1000,1200,1600,2000uM)，b系列H2O2組(設(shè)5個(gè)損傷濃度600uM+5%空白血清,800uM+5%空白血清,1000uM+5%空白血清,1600uM+5%空白血清,2000uM+5%空白血清)，作用4h，檢測(cè)細(xì)胞存活率發(fā)現(xiàn):a系列H2O2組從1200uM開始H2O2對(duì)細(xì)胞的損傷與正常對(duì)照組相比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，而b系列H2O2組細(xì)胞的存活率比同濃度的a系列H2O2組高得多。

我們采取共培養(yǎng)的方式(含藥血清與H2O2同時(shí)作用于細(xì)胞)考察含藥血清的抗氧化作用，由于血清本身抗氧化作用的干擾，使我們無法檢測(cè)出含藥血清的真正作用，現(xiàn)在實(shí)驗(yàn)難開展下去。曾經(jīng)看到一些關(guān)于“血清藥理學(xué)”的體外藥效評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)用的是預(yù)培養(yǎng)，即現(xiàn)有含藥血清作用細(xì)胞，然后再加H2O2損傷，但是對(duì)于血清藥理學(xué)來說，預(yù)培養(yǎng)有意義嗎？請(qǐng)問各位是怎樣看待這個(gè)問題的？望各位賜教。感謝您們。

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1樓 2011-03-12 20:53:51

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shen.wei

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nhwslyt(金幣+1):謝謝參與
nhwslyt(金幣+1): 您分析得有道理，不過要找到這種酶也不太容易，O(∩_∩)O謝謝。。。。 2011-03-13 19:45:55

血清的抗氧化作用是否是某種還原酶起作用，能否在血清中加入該酶的抑制劑然后進(jìn)行給藥的細(xì)胞培養(yǎng)？

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2樓2011-03-12 21:52:32

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nhwslyt(金幣+1):謝謝參與

引用回帖:

Originally posted by shen.wei at 2011-03-12 21:52:32:
血清的抗氧化作用是否是某種還原酶起作用，能否在血清中加入該酶的抑制劑然后進(jìn)行給藥的細(xì)胞培養(yǎng)？

劑量有待探討

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3樓2011-06-21 08:57:27

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小木蟲: 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖

我也是做細(xì)胞氧化模型的。針對(duì)您的帖子我的建議是可以不選擇共培養(yǎng)的方式，可以先加藥物作用2h,再加過氧化氫。可以思考思考，不要急著采納。

我想請(qǐng)問您，您的過氧化氫是用超純水稀釋的嗎？稀釋的時(shí)候混勻會(huì)不會(huì)造成雙氧水分解？

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4樓2017-07-01 16:47:37

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