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【求助】【求助】請(qǐng)問：用細(xì)胞進(jìn)行含藥血清的體外藥效評(píng)價(jià)，應(yīng)該選用共培養(yǎng)，還是預(yù)培
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各位好，我們正在進(jìn)行一個(gè)關(guān)于“血清藥理學(xué)”的實(shí)驗(yàn)，用細(xì)胞評(píng)價(jià)含藥血清的體外藥效。我們以H2O2為模型藥，想建立氧化損傷模型，從而考察藥物的抗氧化損傷作用。在我們的實(shí)驗(yàn)中我們將H2O2與含藥血清同時(shí)作用于細(xì)胞，結(jié)果發(fā)現(xiàn)空白血清本身具有很強(qiáng)的抗氧化性(即清除H2O2的作用)，使我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn)假陽性(所有實(shí)驗(yàn)組的細(xì)胞的存活率都顯著提高，并且存活率幾乎都在同一個(gè)水平)，很明顯細(xì)胞存活率升高可能并不是藥物發(fā)揮的抗氧化作用，而是血清本身具有的抗氧化作用，所以它們的水平很一致。 為了探討血清的抗氧化作用，我們做過這樣一個(gè)實(shí)驗(yàn)：細(xì)胞培養(yǎng)48h后，分別設(shè)空白對(duì)照組，a系列H2O2組(設(shè)5個(gè)損傷濃度600,1000,1200,1600,2000uM)，b系列H2O2組(設(shè)5個(gè)損傷濃度600uM+5%空白血清,800uM+5%空白血清,1000uM+5%空白血清,1600uM+5%空白血清,2000uM+5%空白血清)，作用4h，檢測(cè)細(xì)胞存活率發(fā)現(xiàn):a系列H2O2組從1200uM開始H2O2對(duì)細(xì)胞的損傷與正常對(duì)照組相比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，而b系列H2O2組細(xì)胞的存活率比同濃度的a系列H2O2組高得多。 我們采取共培養(yǎng)的方式(含藥血清與H2O2同時(shí)作用于細(xì)胞)考察含藥血清的抗氧化作用，由于血清本身抗氧化作用的干擾，使我們無法檢測(cè)出含藥血清的真正作用，現(xiàn)在實(shí)驗(yàn)難開展下去。曾經(jīng)看到一些關(guān)于“血清藥理學(xué)”的體外藥效評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)用的是預(yù)培養(yǎng)，即現(xiàn)有含藥血清作用細(xì)胞，然后再加H2O2損傷，但是對(duì)于血清藥理學(xué)來說，預(yù)培養(yǎng)有意義嗎？請(qǐng)問各位是怎樣看待這個(gè)問題的？望各位賜教。感謝您們。 |
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