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[交流]
【求助/交流】CTAB法提DNA時(shí)研磨一定要在低溫進(jìn)行嗎？ 已有6人參與
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RT不知道常溫研磨會(huì)不會(huì)有什么影響�。勘热缯f(shuō)產(chǎn)量？ 還有研磨后水浴之后，是先離心再加氯仿異戊醇還是直接加再離心？急~~ |
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starseacow
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2樓2011-03-18 19:16:05
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5樓2011-03-24 21:55:55
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7樓2011-03-24 22:43:32
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絲狀真菌基因組DNA的提取（CTAB法） — 取幼嫩的菌絲體，用液氮研成粉末，每 0.8 g 裝入 10 mL 的離心管中； — 預(yù)熱 1.5×CTAB 到 95 ℃，加 2 mL 到裝有菌絲粉末的離心管中，混勻； — 立即置于 65 ℃ 水浴 30 min，每分鐘，上下顛倒 1 次； — 12000 g 離心 5 分鐘； — 吸取上清液，加等體積的氯仿，上下顛倒數(shù)次；12000 g 離心 5 分鐘； — 吸取上清液，加等體積的酚，上下顛倒數(shù)次；12000 g 離心 5 分鐘； — 吸取上清液，加等體積的氯仿，上下顛倒數(shù)次；12000 g 離心 5 分鐘； — 取上清，加入 2 倍體積的無(wú)水乙醇和 1/10 體積的 10 M NH4Ac，混勻，室溫放置 10 min； — 12000 g 離心 10 分鐘，去上清，用 75% 乙醇洗沉淀，自然干燥； — 加 100uL 的 TE 或無(wú)菌水。 樓主，我也是做真菌轉(zhuǎn)化的，有好的東西一起分享哈O(∩_∩)O~ |
8樓2011-03-25 13:37:53
yoviee
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9樓2012-09-19 11:27:04
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