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395353759銅蟲 (小有名氣)
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【求助】脂肪酸標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行甲酯化后再氣相色譜測(cè)定,要配成一定的濃度（1mg/ml），怎么? 已有5人參與
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我要對(duì)脂肪酸標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行甲酯化后再氣相色譜測(cè)定，遇到的問題是：要配成一定的濃度（1mg/ml），怎么計(jì)算？ 參考的甲酯化方法如下：“總脂用10mL甲醇溶解后轉(zhuǎn)移至分液漏斗中，用15mL正己烷分三次洗滌，所得甲醇溶液轉(zhuǎn)移到大試管中，加入4mLp(KOH)=1％KOH的甲醇溶液，60℃水浴加熱15min，冷卻后加入5滴p(BF3)=20％的BF3乙醚溶液，靜置l0min酯化。酯化后的樣品加入5mL的重蒸正己烷和10ml水，分去水溶液，有機(jī)層用10mL水洗滌。取2．0ml的有機(jī)層加入一定量的硅膠，不振蕩靜置2．0min。取20．0uL的有機(jī)層加入到含有1．0mL正己烷的具塞試管中備用，作為進(jìn)行氣相色譜分析的樣品�！边@個(gè)方法是否可行？可行的話，我要稱取多少脂肪酸標(biāo)準(zhǔn)品的量進(jìn)行？上面方法中的試劑的量是否合適？最后取20ul有機(jī)層用1ml正己烷定容，這是不是就是最后脂肪酸甲酯化后的濃度？怎么計(jì)算他的濃度是多少？拜托，幫忙一下，第一次做色譜，自己老師也不懂！��！ |
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| 這個(gè)過程中其實(shí)不需要定容的，你知道你知道你所用來測(cè)定脂肪酸的總脂的量就成。在甲酯化好之后加入一定量的你已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品（標(biāo)準(zhǔn)品只需要已知濃度就成，1mg/ml左右均可），也就只你知道加入了多少的標(biāo)準(zhǔn)品。最后根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品以及氣相的出峰面積就可以得出各種脂肪酸的含量了～不過這個(gè)過程中還涉及到甲酯化程度的計(jì)算，也就是說標(biāo)準(zhǔn)品的量:總的甲酯化的樣品的量=標(biāo)準(zhǔn)品的面積:總的甲酯化的脂肪酸的面積，其中標(biāo)準(zhǔn)品的量，標(biāo)準(zhǔn)品的面積，總的甲酯化的脂肪酸的面積均已知，可算出總的甲酯化的脂肪酸的量。根據(jù)最開始用來甲酯化的總脂量以及甲酯化好后總的脂肪酸的量，可以算出甲酯化的程度（及甲酯化的%），最后根據(jù)各個(gè)脂肪酸與標(biāo)準(zhǔn)品的比計(jì)算出各個(gè)甲酯化好后脂肪酸的量，在根據(jù)甲酯化程度計(jì)算出各個(gè)脂肪酸的量。呵呵～～不知道你明白了不？ |
2樓2011-03-28 14:23:46
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不明白�？梢詫�(duì)著我的問題再講一遍嗎？ 3樓2011-03-28 15:32:38
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我有點(diǎn)搞不清楚你是測(cè)標(biāo)樣呢還是測(cè)什么了？要是你是用標(biāo)樣來測(cè)定脂肪酸的話，這個(gè)過程基本上是可以的。如果你僅僅是測(cè)標(biāo)樣的話，貌似你不需要定量吧，只要測(cè)出一個(gè)出峰時(shí)間就可以了。 另外建議你家了KOH和BF3后均沸水浴，分別15、10分鐘即可，但是水浴過程中最好充氮?dú)獗Ｗo(hù)～ 至于你說的最開始的配標(biāo)樣的濃度，這個(gè)就是準(zhǔn)確稱取一定的標(biāo)樣，用容量瓶配制溶液就好了啊～1mg/l左右即可。 |
4樓2011-03-28 20:35:42
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