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395353759銅蟲 (小有名氣)
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[交流]
【求助】脂肪酸標準品進行甲酯化后再氣相色譜測定,要配成一定的濃度（1mg/ml），怎么? 已有5人參與
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我要對脂肪酸標準品進行甲酯化后再氣相色譜測定，遇到的問題是：要配成一定的濃度（1mg/ml），怎么計算？ 參考的甲酯化方法如下：“總脂用10mL甲醇溶解后轉(zhuǎn)移至分液漏斗中，用15mL正己烷分三次洗滌，所得甲醇溶液轉(zhuǎn)移到大試管中，加入4mLp(KOH)=1％KOH的甲醇溶液，60℃水浴加熱15min，冷卻后加入5滴p(BF3)=20％的BF3乙醚溶液，靜置l0min酯化。酯化后的樣品加入5mL的重蒸正己烷和10ml水，分去水溶液，有機層用10mL水洗滌。取2．0ml的有機層加入一定量的硅膠，不振蕩靜置2．0min。取20．0uL的有機層加入到含有1．0mL正己烷的具塞試管中備用，作為進行氣相色譜分析的樣品。”這個方法是否可行？可行的話，我要稱取多少脂肪酸標準品的量進行？上面方法中的試劑的量是否合適？最后取20ul有機層用1ml正己烷定容，這是不是就是最后脂肪酸甲酯化后的濃度？怎么計算他的濃度是多少？拜托，幫忙一下，第一次做色譜，自己老師也不懂�。。� |
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4樓2011-03-28 20:35:42
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小木蟲(金幣+0.5):給個紅包，謝謝回帖交流
小木蟲(金幣+0.5):給個紅包，謝謝回帖交流
| 這個過程中其實不需要定容的，你知道你知道你所用來測定脂肪酸的總脂的量就成。在甲酯化好之后加入一定量的你已知濃度的標準品（標準品只需要已知濃度就成，1mg/ml左右均可），也就只你知道加入了多少的標準品。最后根據(jù)標準品以及氣相的出峰面積就可以得出各種脂肪酸的含量了～不過這個過程中還涉及到甲酯化程度的計算，也就是說標準品的量:總的甲酯化的樣品的量=標準品的面積:總的甲酯化的脂肪酸的面積，其中標準品的量，標準品的面積，總的甲酯化的脂肪酸的面積均已知，可算出總的甲酯化的脂肪酸的量。根據(jù)最開始用來甲酯化的總脂量以及甲酯化好后總的脂肪酸的量，可以算出甲酯化的程度（及甲酯化的%），最后根據(jù)各個脂肪酸與標準品的比計算出各個甲酯化好后脂肪酸的量，在根據(jù)甲酯化程度計算出各個脂肪酸的量。呵呵～～不知道你明白了不？ |
2樓2011-03-28 14:23:46
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不明白。可以對著我的問題再講一遍嗎？ 3樓2011-03-28 15:32:38
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