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鬼筆壞壞新蟲 (初入文壇)
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[交流]
【求助/交流】怎么做都提不出DNA,請(qǐng)高手幫一下忙嘍。。! 已有23人參與
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怎么做都提不出DNA,請(qǐng)高手幫一下忙嘍。。! 我是從青霉菌里提的,開始用的SDS法,液氮研磨+500ul抽提緩沖液65℃水浴1h后,12000離心10min,加兩次氯仿:異戊醇(24:1)后離心10Min,12000收集上清,加等體積異丙醇-20放置30min以上,13500離心,用75%乙醇洗無(wú)菌風(fēng)吹干后加無(wú)菌水溶的,結(jié)果跑電泳只有RNA。然后做了好多次都這樣。又換的氯化芐法,(液氮研磨0.1g+500ul緩液+125uLDE 10%SDS+300uL氯化芐,50℃,1h)做這個(gè)我連醋酸鈉PH都調(diào)到5.2了,結(jié)果還是沒有。就崩潰了,麻煩高手給指導(dǎo)一下。! [ Last edited by 1949stone on 2011-4-21 at 12:54 ] |
銅蟲 (小有名氣)
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木蟲 (小有名氣)

新蟲 (初入文壇)
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回復(fù):我是從青霉菌里提的,開始用的SDS法,液氮研磨+500ul抽提緩沖液65℃水浴1h后,12000離心10min,加兩次氯仿:異戊醇(24:1)后離心10Min,12000收集上清,加等體積異丙醇-20放置30min以上,13500離心,用75%乙醇洗無(wú)菌風(fēng)吹干后加無(wú)菌水溶的,結(jié)果跑電泳只有RNA。然后做了好多次都這樣。又換的氯化芐法,(液氮研磨0.1g+500ul緩液+125uLDE 10%SDS+300uL氯化芐,50℃,1h)做這個(gè)我連醋酸鈉PH都調(diào)到5.2了,結(jié)果還是沒有。就崩潰了,麻煩高手給指導(dǎo)一下!。 |
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