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[交流]
【求助/交流】DNA提取問(wèn)題
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藻類全基因組DNA粗提取后進(jìn)行電泳，想看看到底有沒(méi)有提到DNA。之前測(cè)得 A280 = 0.467 A260 = 0.949 A230 = 0.373 A260/ A280 = 2.03 A260/ A230 = 2.55 濃度：C = 47.4ng/µL 1%瓊脂糖凝膠電泳，結(jié)果電泳Marker跑出來(lái)了，但是未看到我所提的DNA條帶，那是什么原因？ 求解！��！ |
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2樓2011-04-10 11:56:46
3樓2011-04-10 12:37:29
王有朝(金幣+2): 哦，謝謝你。乙醇揮發(fā)不干凈會(huì)導(dǎo)致樣品從上樣孔跑出來(lái)嗎？ 2011-04-12 15:22:28
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4樓2011-04-10 16:05:54
5樓2011-04-10 16:15:50
西瓜
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★ ★ ★ ★ ★ ★
dhd997(金幣+6): good 2011-04-11 13:52:52
王有朝(金幣+1): 我不是用的EB，用的是GOLD VIEW。含量是很低，藻類全基因組能提到多少怎么才能查到�。课乙惨恢辈恢肋@個(gè)問(wèn)題。 2011-04-12 15:23:51
dhd997(金幣+6): good 2011-04-11 13:52:52
王有朝(金幣+1): 我不是用的EB，用的是GOLD VIEW。含量是很低，藻類全基因組能提到多少怎么才能查到�。课乙惨恢辈恢肋@個(gè)問(wèn)題。 2011-04-12 15:23:51
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EB染色的話，能看到條帶的DNA量下限大約是10ng，而且往往達(dá)不到。 您的濃度如果是 47.4ng/ml的話，顯然太低，超過(guò)了EB染色的分辨率。 藻類全基因組DNA粗提一般能提到多少量的DNA? 另外，電泳問(wèn)題最好上圖，方便大家分析哦。 |
6樓2011-04-10 19:13:41
wqj1988926
金蟲 (正式寫手)
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7樓2011-04-11 12:47:09
★
小木蟲(金幣+0.5):給個(gè)紅包，謝謝回帖交流
小木蟲(金幣+0.5):給個(gè)紅包，謝謝回帖交流
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本帖內(nèi)容被屏蔽 |
8樓2011-04-12 21:17:04
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木蟲(金幣+0.5):給個(gè)紅包，謝謝回帖交流
西瓜(金幣+5): 鼓勵(lì)新朋友參與交流+3，鼓勵(lì)上圖+2。 2011-04-13 16:38:14
小木蟲(金幣+0.5):給個(gè)紅包，謝謝回帖交流
西瓜(金幣+5): 鼓勵(lì)新朋友參與交流+3，鼓勵(lì)上圖+2。 2011-04-13 16:38:14
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我對(duì)你的回答持懷疑態(tài)度，EB染色法，DNA量下線絕對(duì)不到10ng，而且遠(yuǎn)低于這個(gè)，我曾經(jīng)在南方基因組做過(guò)測(cè)序工作，測(cè)序上樣量最少要10ng/ul，因此我們回收后要做個(gè)定量電泳。我傳個(gè)圖片給你看看,定量的上樣量都是1ul，定量maker為10ng/ul. LZ的DNA量沒(méi)有問(wèn)題，像這種檢測(cè)存在DNA，但電泳沒(méi)有條帶的,maker都能跑出來(lái)的情況，據(jù)我了解很大一部分都是個(gè)人操作問(wèn)題（包括操作，試劑配制，緩沖液濃度，loading buffer問(wèn)題等），往往換個(gè)人，就可以跑出來(lái)了。。。 |
9樓2011-04-13 14:06:19
10樓2011-04-14 18:43:06
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