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[交流]
【求助/交流】電泳時候，什么時候用穩(wěn)壓？什么時候用穩(wěn)流？？？ 已有7人參與
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| 如題所述，電泳時候，什么時候用穩(wěn)壓？什么時候用穩(wěn)流？？？我只知道電泳槽兩端存在電壓差是條帶跑開的動力，但是穩(wěn)壓，穩(wěn)流的原因就不知道了。有分子達人沒？幫小弟解答一下吧。 |
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jhu132llh
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1949stone(金幣+2, EPI+1): 不錯 2011-04-09 09:47:42
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1949stone(金幣+2, EPI+1): 不錯 2011-04-09 09:47:42
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1、一般跑核酸用恒壓,而跑蛋白質(zhì)用恒流。 2、需要控制發(fā)熱量時用恒功率，如轉(zhuǎn)膜的時候一般會選擇恒流或者恒功率。 3、SDS-PAGE 一般是恒壓居多；Western Blot一般是恒流居多；核酸的 AE 是兩者差別不大。 4、Gel Shift也是兩者差別不大//注意散熱就行 至于很多人迷惑的為什么恒壓的條件下電流會緩慢升高的問題請參考下文： http://www.mnstate.edu/provost/FasterDNAGels.pdf 文章索然比較老了 但是論述的是原理性的東東 論述的還可以的 大家都可以看看 [ Last edited by jhu132llh on 2011-4-9 at 09:46 ] |
3樓2011-04-09 09:44:51
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dhd997(金幣+6, EPI+1): good 2011-04-09 08:36:01
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dhd997(金幣+6, EPI+1): good 2011-04-09 08:36:01
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在電泳的過程中，電壓和電流的大小與板的長度，緩沖液的pH，離子強度等很多因素都有關(guān)系，而且二者之間又有互相制約的關(guān)系。 一般的電泳儀，可調(diào)的都是最大電壓和最大電流，也許你已經(jīng)注意到了，跑電泳的時候電壓和電流二者很難同時都達到你設(shè)定的值，而是其中一個值符合，另一個比你設(shè)定的值要小。 例如你設(shè)定的最大電壓150V，最大電流40mA,這時由于各種因素的影響，可能實際情況是這樣的，電壓100V，電流40mA，這樣的時候就是恒流了，因為電壓受電流的制約，不能再升高了，而最大電流已經(jīng)達到了，如果想要調(diào)高電壓，那么就需要把最大電流調(diào)高，電壓才能相應(yīng)升高。也有可能是這樣的情況，電壓150V，電流30mA，這時候就是恒壓了，同理。 我一般使用恒壓，因為電泳過程中，緩沖液電阻增大，如果保持恒流，有可能使體系過熱導(dǎo)致溶膠。 樓主在跑電泳的時候只要確定是恒壓還是恒流就可以了，個人認為二者沒有大的差異，只要電壓和電流都達到了一定的值，都是可以跑出好效果的，祝順利。 |
2樓2011-04-09 06:39:57
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4樓2011-04-09 10:35:48
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