bettyshan

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[交流] 【求助/交流】枯草芽孢桿菌基因敲除~~

想請教一下做枯草芽孢桿菌的朋友，枯草芽孢桿菌敲除目前有沒有無抗敲除的方法呢？那個WB700的菌是利用什么方法獲得的，為什么能夠敲除那么多的基因？都是用的有抗敲除嗎？
如果總是用抗性的話那是不是只能敲除有限的基因啦？~~

謝謝幫我解答啦~~~

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1樓 2011-04-09 11:41:28

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serena1205

新蟲 (初入文壇)

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★
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引用回帖:

507313樓: Originally posted by 天使托 at 2011-04-09 17:49:20
想請教一下做枯草芽孢桿菌的朋友，枯草芽孢桿菌敲除目前有沒有無抗敲除的方法呢？（你的無抗是指沒有抗生素嗎？當(dāng)然有了，不過你自己詳細(xì)查查，抗生素其實起到的只是幫助篩選的作用，這樣可以簡化很多實驗步驟）

...

要是引入了抗性基因又怎么在敲除抗性基因呢

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5樓2013-03-15 22:51:54

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天使托

專家顧問 (職業(yè)作家)

★ ★ ★ ★ ★
rainwander(金幣+5, EPI+1): 呵呵，不錯，給予鼓勵 2011-04-09 17:54:09
bettyshan(金幣+2): 謝謝給了我這么詳細(xì)的回答~~~ 2011-04-10 15:32:42

想請教一下做枯草芽孢桿菌的朋友，枯草芽孢桿菌敲除目前有沒有無抗敲除的方法呢？（你的無抗是指沒有抗生素嗎？當(dāng)然有了，不過你自己詳細(xì)查查，抗生素其實起到的只是幫助篩選的作用，這樣可以簡化很多實驗步驟）

那個WB700的菌是利用什么方法獲得的，（這個由于我做的是P.aeruginosa,你說的這個菌還真是沒有見過，不過你可以查閱一下相關(guān)的資料，絕對有的�。�
為什么能夠敲除那么多的基因？（不是為什么能夠敲除那么多基因，而是看你做什么用，如果必要的話才會去敲除，如果這個基因和你所研究的課題沒有任何關(guān)系，試問你會無緣無故去敲除它嗎？NO，浪費時間�。�
都是用的有抗敲除嗎？（敲除基因只是研究基因功能的一個方法，當(dāng)然了還有別的研究基因的方法，敲除也分很多種，插入突變，缺失突變orRNAi都可以的�。�
如果總是用抗性的話那是不是只能敲除有限的基因啦？~~（并不是，只要你想敲除某個基因，載體構(gòu)建好之后就可以進(jìn)行敲除。。。。）

ps:我一個一個給你解答！見括號！

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2樓2011-04-09 17:49:20

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scelab

榮譽版主 (文壇精英)

★ ★
rainwander(金幣+2): 呵呵，估計是沒有，鼓勵交流~~ 2011-04-10 00:05:39

lz有查過文獻(xiàn)嗎？

doi:10.1128/AEM.01156-08

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3樓2011-04-09 19:07:06

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hkfgwww

銀蟲 (正式寫手)

★ ★
rainwander(金幣+2): 鼓勵交流~~~ 2011-04-10 00:05:07

引用回帖:

Originally posted by bettyshan at 2011-04-09 11:41:28:
想請教一下做枯草芽孢桿菌的朋友，枯草芽孢桿菌敲除目前有沒有無抗敲除的方法呢？那個WB700的菌是利用什么方法獲得的，為什么能夠敲除那么多的基因？都是用的有抗敲除嗎？
如果總是用抗性的話那是不是只能敲除有 ...

關(guān)于敲除有大量的文獻(xiàn)報道，要做到反敲除（即抗性基因的敲除）需要合適的質(zhì)粒，例如溫敏型質(zhì)粒。

可以參考WB600的構(gòu)建，其實就是在其基礎(chǔ)上再敲除了一個蛋白酶，還有WB800也是一樣。

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4樓2011-04-09 20:08:45

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