[交流] 【求助】高速離心可以分離提純蛋白質(zhì)嗎？

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1樓 2011-04-10 09:36:19

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lebron110

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Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2011-04-10 16:35:40:
我很想問樓主，你這問題，我覺得搞得我頭腦一團漿糊，你這到底是用什么樣的樣品，想達到怎么樣的效果，最終要有多純，離心之后的后續(xù)實驗最想做什么，或者接著什么步驟，這些都不清楚。另外，我查了一下，這一類蛋 ...

我是絲素蛋白溶液，由于絲素在用氯化鈣水解時，分子量大小不均一，我想把分子量大的和小的分開，接下來用分子量大的和小的溶液處理人工老化的絲綢織物，說白了是絲素蛋白分級，不知道有沒有說清楚，謝謝大俠

9樓2011-04-10 21:45:28

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huierlucky

木蟲 (著名寫手)

★
lstt09nk(金幣+1): 鼓勵交流，歡迎常來 2011-04-10 21:00:12

高速離心可以提純蛋白，轉(zhuǎn)速最好大于4000轉(zhuǎn)，如果跟超濾管一起，效果更好。

2樓2011-04-10 09:40:29

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huierlucky

木蟲 (著名寫手)

看天(EPI+1): 2011-04-10 09:47:25
lebron110(金幣+2): 2011-04-10 16:07:35

高速離心可以提純蛋白，轉(zhuǎn)速最好大于4000轉(zhuǎn)，如果跟超濾離心管一起，效果更好。

3樓2011-04-10 09:41:38

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wqj1988926

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★ ★ ★ ★
看天(金幣+4): 鼓勵回答 2011-04-10 09:48:15

同意樓上，后者采用雙水相差速離心

4樓2011-04-10 09:42:20

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zxl_6018

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lebron110(金幣+2): 2011-04-10 16:07:54

可以的，但要控制好轉(zhuǎn)速！

5樓2011-04-10 09:51:29

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朋友，我也想問一下，我是除蛋白，也能用這種方法嗎？

6樓2011-04-10 09:59:26

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lebron110

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Originally posted by huierlucky at 2011-04-10 09:40:29:
高速離心可以提純蛋白，轉(zhuǎn)速最好大于4000轉(zhuǎn)，如果跟超濾管一起，效果更好。

謝謝大俠

7樓2011-04-10 16:04:08

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冼亮淀粉酶

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lebron110(金幣+2): 2011-04-11 10:23:53

我很想問樓主，你這問題，我覺得搞得我頭腦一團漿糊，你這到底是用什么樣的樣品，想達到怎么樣的效果，最終要有多純，離心之后的后續(xù)實驗最想做什么，或者接著什么步驟，這些都不清楚。另外，我查了一下，這一類蛋白質(zhì)的水溶性似乎普遍較差，樓主的蛋白質(zhì)水溶性怎樣？

8樓2011-04-10 16:35:40

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dreaming0816

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可以提純啊，提取蛋白的過程中也用到高速冷凍離心啊。。。

10樓2011-04-10 22:14:57

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rcw2006

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lebron110(金幣+1): 2011-04-11 21:38:29
lebron110(金幣+1): 2011-04-11 21:38:37

可以的，

11樓2011-04-11 10:35:50

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冼亮淀粉酶

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★ ★
reasonspare(金幣+2): 謝謝分享 2011-04-16 11:36:47

引用回帖:

Originally posted by lebron110 at 2011-04-10 21:45:28:
我是絲素蛋白溶液，由于絲素在用氯化鈣水解時，分子量大小不均一，我想把分子量大的和小的分開，接下來用分子量大的和小的溶液處理人工老化的絲綢織物，說白了是絲素蛋白分級，不知道有沒有說清楚，謝謝大俠

我也只能想到離心超濾管了，不過我用的轉(zhuǎn)速不是限定的，看買到的離心管大小，看用什么樣的轉(zhuǎn)頭。超濾可以試著用10KD的，可能大于10KD的也有少量滲透出去，我用超濾膜片和管都做過，我的酶20-30KD，能有5%透過截留分子量為3KD的膜。

12樓2011-04-15 23:27:07

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匿名

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小木蟲(金幣+0.5):給個紅包，謝謝回帖

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