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donglining銅蟲(chóng) (小有名氣)
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[交流]
【求助/交流】DNS法測(cè)棕紅色發(fā)酵培養(yǎng)基中還原糖能行嗎 已有4人參與
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大家好，我們實(shí)驗(yàn)室利用了國(guó)產(chǎn)試劑配的LB培養(yǎng)基，有點(diǎn)棕紅色， 我看DNS測(cè)還原糖原理是黃色的DNS與還原糖反應(yīng)生成棕紅色的物質(zhì)，利用顏色深淺進(jìn)行比色來(lái)測(cè)還原糖， 現(xiàn)在我的培養(yǎng)基就有點(diǎn)棕紅色，這樣測(cè)準(zhǔn)嗎？ 我用沒(méi)有接菌的培養(yǎng)基作為調(diào)0對(duì)照，效果也不太好，不知道有沒(méi)有遇到這種情況的？ 煩請(qǐng)各位多多幫忙，挺急的，謝謝。 |
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冼亮淀粉酶
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rainwander(金幣+5, EPI+1): 鼓勵(lì)交流~ 2011-04-18 13:31:06
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rainwander(金幣+5, EPI+1): 鼓勵(lì)交流~ 2011-04-18 13:31:06
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我現(xiàn)在做實(shí)驗(yàn)已經(jīng)不用LB了，幾年前用過(guò)，但是沒(méi)想過(guò)是否對(duì)DNS測(cè)定還原糖有影響，看到這個(gè)帖子就有了點(diǎn)好奇心，做了一次。我們實(shí)驗(yàn)室用的藥品是進(jìn)口的，雖然配制出來(lái)沒(méi)有多紅，但似乎也對(duì)DNS法測(cè)定有些影響。我用超純水配制了四種溶液（每種溶液為三管）： 1、超純水 2、含有0.1微克/微升葡萄糖的超純水 3、LB 4、含有0.1微克/微升葡萄糖的LB 理論上顯色之后吸光度1=3，2=4，2-1=4-3，但事實(shí)上不是 再配制一次溶液，兩次結(jié)果相似。 所以樓主需慎重。話說(shuō)過(guò)了好幾天，樓主自己也應(yīng)該做了很多實(shí)驗(yàn)了，就是不見(jiàn)回來(lái)。 [ Last edited by 冼亮淀粉酶 on 2011-4-18 at 00:38 ] |
4樓2011-04-18 00:29:59
jingcao3081
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2樓2011-04-10 23:04:44
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rainwander(金幣+2): 鼓勵(lì)交流�。。� 2011-04-12 19:58:47
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這方法原理上就說(shuō)不通， 你的培養(yǎng)基會(huì)變成棕紅色，是因?yàn)槠渲械倪�原性糖和蛋白胨中氨基酸類物質(zhì)發(fā)生反應(yīng)，但這種反應(yīng)并沒(méi)有把糖和氨基酸完全消耗掉。所以你在用DNS法測(cè)還原性糖時(shí)，等于同時(shí)存在氨基酸類物質(zhì)和DNS同時(shí)與還原性糖發(fā)生反應(yīng)，其結(jié)果肯定異常。 |
3樓2011-04-12 13:52:45
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我覺(jué)得還是你從新配吧，方法是 1. DNS溶液配制 稱�。–4H4KNaO6.4H2O）257.76g（如果是無(wú)水酒石酸鉀鈉則為192g），溶于500mL蒸餾水中，加熱（不超過(guò)50℃），于熱溶液中依次加入3，5-二硝基水楊酸6.3g，NaOH 21.0g，苯酚5.0g，無(wú)水亞硫酸鈉5.0g，攪拌至溶解完全，冷卻后用蒸餾水定容至1000mL，貯存于棕色瓶中，室溫保存。 估計(jì)你的dns過(guò)期了都多長(zhǎng)時(shí)間了哈哈 我一般是半年重新配一遍，dns不是不好容嗎你用超聲波清洗器震一下就好了哈哈 |
5樓2011-05-23 16:10:20
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