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[交流]
【求助/交流】酶提取液的問題
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以下是我的操作步驟: 取藻液3ml,4℃、10 000 r/min冷凍離心10min,棄上清液,稱量其質(zhì)量,加4.0ml磷酸緩沖溶液(0.05mol/L,PH7.0)在冰浴下超聲破碎(400w,超聲10s間隔10s,操作10分鐘)接著在4℃下以8000 r/min冷凍離心20分鐘,此上清液為酶提取。 然后用該酶提取液去做POD酶活性實驗,可是一點反應也沒有,沒任何顏色變化啊, 求高手指導 我錯在哪了,是酶提取液的問題? 我用冰浴研磨的,可是一點酶活性也測不出來 ,我用冰浴超聲波破碎的,也沒有一點酶活性,但是研磨的也測不出蛋白質(zhì),超聲的可以測出蛋白質(zhì),請問大俠這是什么情況了,會不是藻太少的緣故? 還有就是測蛋白質(zhì)的酶粗液研磨的時候 溫度對蛋白質(zhì)的影響大嗎?研磨用的磷酸緩沖液PH 對蛋白質(zhì)的影響大嗎 還有就是高速離心怎么有時離心效果好,有時離心效果不好,高速離心機是好的啊 [ Last edited by 阿叉 on 2011-4-14 at 19:38 ] |
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