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[交流]
【求助/交流】怎么鑒別植物細胞是活著還是死了，有任何想法的都請不吝指教，謝謝
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我這邊需要鑒定木頭是否經(jīng)過了80度以上的熱處理。我想處理后植物細胞肯定死了，所以想通過鑒定植物細胞是活著還是死了的方法來判定是否經(jīng)過了6小時80度的熱處理。我們知道活著的細胞有滲透壓，死后就沒了，可不可以把部分木頭浸泡在某種顏色的溶液中，通過顯微鏡來觀察細胞內(nèi)是否有顏色來判定。 1 如果可以，請教一下一般用哪種溶液，本人不是很懂這方面的請指教。 2 如果不可以，還有什么辦法。 3 如果您有什么好辦法都可以說說，再次先說聲謝謝了。 |
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9樓2011-04-19 11:48:15
用活體染色技術(shù)鑒定植物細胞死活的方法
★ ★ ★ ★
zwj0420(金幣+1):謝謝參與
咸魚(金幣+3): 感謝認真回帖交流~ 2011-04-14 20:46:01
zwj0420(金幣+5): 感謝回復(fù)，非常用心，雖然說的不是帶有纖維壁的細胞但是也有很好的參考借鑒意義，非常感謝 2011-04-14 21:56:18
zwj0420(金幣+1):謝謝參與
咸魚(金幣+3): 感謝認真回帖交流~ 2011-04-14 20:46:01
zwj0420(金幣+5): 感謝回復(fù)，非常用心，雖然說的不是帶有纖維壁的細胞但是也有很好的參考借鑒意義，非常感謝 2011-04-14 21:56:18
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活體染色是利用某種對植物無害的染料稀溶液進行活細胞染色的技術(shù)。中性紅是常用的活體染料之一，它是一種堿性染料，也是一種弱堿性PH指示劑，變色范圍在PH6.8—8.0之間（由紅變黃）。在中性或微堿性環(huán)境中，植物的活細胞能大量吸收中性紅并向液泡內(nèi)排泌。由于液泡通常呈酸性反應(yīng)，因此進入液泡的中性紅呈現(xiàn)櫻桃紅色， 在這種情況下，原生質(zhì)和細胞壁一般不著色。死細胞由于膜的選擇透性消失，液泡破壞，因此不產(chǎn)生液泡著色現(xiàn)象。但中性紅的陽離子卻與帶有一定負電荷的原生質(zhì)及細胞核結(jié)合，使原生質(zhì)和細胞核染色。本實驗需要如下材料和用具：洋蔥鱗莖、小麥葉片或紫鴨跖草葉片、刀片、尖頭鑷子、載玻片、蓋玻片、顯微鏡、0.03％中性紅溶液、1M硝酸鉀溶液、酒精燈。實驗步驟： 1.削取較幼嫩的洋蔥鱗片，在內(nèi)表面切割5平方毫米左右的方形切痕，用尖鑷子撕下這塊內(nèi)表皮，投入0.03％的中性紅溶液中。如用小麥葉片，表皮不易撕取，可把葉片平放載玻片上，加水蘸濕，用刀片輕輕刮去上表皮、葉肉和葉脈，只留下一層下表皮，再切割成5平方毫米的小片。 2.染色10－15分鐘后取出，用蒸餾水稍加沖洗，在低倍鏡下觀察，此時主要是細胞壁染色，原生質(zhì)和液泡不著色。 3.將制片放在自來水（PH略高于7.0）中浸泡10－15分鐘，再進行顯微觀察，此時細胞壁完且脫色，液泡染成均勻的櫻桃紅色，細胞核和原生質(zhì)不著色。 4.將染好的表皮浸入1M的硝酸鉀溶液中，約10分鐘后取出觀察。由于鉀離子能使原生質(zhì)膨脹，發(fā)生帽狀質(zhì)壁分離，因此能清楚地看到無色透明的原生質(zhì)和染為紅色的液泡。 5.將表皮組織加熱或酒精浸泡，殺死細胞后再染色，則可看到死細胞的細胞質(zhì)及細胞核都染上顏色，而看不到活細胞具有的液泡染色現(xiàn)象。 如將步驟3中的活染制片在酒精燈火焰上微微加熱，以殺死細胞，也可看到原生質(zhì)呈不均勻的凝膠狀，與細胞核一起被染成紅色。另外，在活染制片中仔細尋找，也可能看到個別死細胞，經(jīng)中性紅染色后其細胞核清晰可辨。 |
3樓2011-04-14 17:43:47
4樓2011-04-15 09:01:25
jhu132llh
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5樓2011-04-15 15:40:35
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