Chlo_Q

木蟲 (著名寫手)

[交流] 【交流】25cm^2和75cm^2培養(yǎng)瓶的區(qū)別，關(guān)于懸浮的THP-1細(xì)胞培養(yǎng)

使用25cm^2的小培養(yǎng)瓶培養(yǎng)THP-1細(xì)胞，豎立放置，細(xì)胞生長狀態(tài)良好，二到三天培養(yǎng)液就非常的黃了，養(yǎng)了十來天，每三天一傳代，感覺挺好的
因?yàn)樾枰募?xì)胞量比較大，所以前天改成了用75cm^2的大培養(yǎng)瓶培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)液不怎么變色了，細(xì)胞散散的，數(shù)量不見增加
想了一下，THP-1細(xì)胞對細(xì)胞濃度的要求比較高，而本身又可以歸屬于半貼壁細(xì)胞，雖然培養(yǎng)液放了有30ml，但細(xì)胞都是沉在瓶底的，無論是大瓶還是小瓶，所以，相對于言，改用大瓶后，雖然細(xì)胞濃度一樣，培養(yǎng)液的量也差不多，但沉積的面積大了，所以密度相對的是過低的，以致對細(xì)胞濃度有要求的THP-1細(xì)胞長不起來了
感覺，推理中有些問題，但又想不出更好的解釋來，請各位蟲友們指教

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1樓 2011-04-16 22:42:35

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dianaofyezi

金蟲 (正式寫手)

Chlo_Q(金幣+5): 謝謝，給我了很有用的信息 2011-04-17 13:59:28

從25到75的過程中對細(xì)胞的密度是有要求的，有些細(xì)胞增殖能力很強(qiáng)的，比如雜交瘤細(xì)胞，擴(kuò)大培養(yǎng)的時候密度稀一點(diǎn)問題還不是很大。過幾天就能漲起來。一般細(xì)胞與細(xì)胞之間是有信號傳遞了，密度太低了，其周圍的營養(yǎng)物質(zhì)分泌不夠的話，很難張起來，也有可能會看到部分細(xì)胞死亡的情況。

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2樓2011-04-17 11:48:01

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Chlo_Q

木蟲 (著名寫手)

引用回帖:

Originally posted by dianaofyezi at 2011-04-17 11:48:01:
從25到75的過程中對細(xì)胞的密度是有要求的，有些細(xì)胞增殖能力很強(qiáng)的，比如雜交瘤細(xì)胞，擴(kuò)大培養(yǎng)的時候密度稀一點(diǎn)問題還不是很大。過幾天就能漲起來。一般細(xì)胞與細(xì)胞之間是有信號傳遞了，密度太低了，其周圍的營養(yǎng) ...

前輩您好
我是細(xì)胞實(shí)驗(yàn)新手，這里說的對密度有要求，是單指對貼壁細(xì)胞而言還是包括懸浮細(xì)胞��？因?yàn)橘N壁面積對于貼壁細(xì)胞的影響大些，而懸浮細(xì)胞是豎直放置的，只是瓶底面積會產(chǎn)生一定的影響，并不像貼壁面積那么大
我現(xiàn)在養(yǎng)的是懸浮細(xì)胞，三天一傳代，大前天傳到大瓶子里來之后已經(jīng)三天了，考慮到操作要規(guī)則，所以還是打算給它傳代了，雖然。�！，F(xiàn)在的細(xì)胞數(shù)沒見長。那我現(xiàn)在直接重新傳到小瓶子里，應(yīng)該對它的影響小些吧？

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3樓2011-04-17 14:27:29

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dianaofyezi

金蟲 (正式寫手)

Chlo_Q(金幣+5): 感謝 2011-04-17 15:32:37

懸浮細(xì)胞同樣對密度有要求啊。太稀總是不好的。如果你要是有小瓶中長好的細(xì)胞，再給大瓶補(bǔ)點(diǎn)，看在三天后能提高數(shù)量不。要不然給你就要傳很多小瓶來滿足你試驗(yàn)中對細(xì)胞數(shù)量的要求了。

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4樓2011-04-17 15:02:35

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Chlo_Q

木蟲 (著名寫手)

引用回帖:

Originally posted by dianaofyezi at 2011-04-17 15:02:35:
懸浮細(xì)胞同樣對密度有要求啊。太稀總是不好的。如果你要是有小瓶中長好的細(xì)胞，再給大瓶補(bǔ)點(diǎn)，看在三天后能提高數(shù)量不。要不然給你就要傳很多小瓶來滿足你試驗(yàn)中對細(xì)胞數(shù)量的要求了。

恰恰原本養(yǎng)著的兩小瓶都被我心急的同時傳到大瓶里來了。我也不好合并，怕出問題就都完了，看來我只能是在今晚傳回小瓶子里了
對了，話說我的密度沒稀釋啊，真的是沉積面積的問題嗎？

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5樓2011-04-17 15:36:04

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Chlo_Q

木蟲 (著名寫手)

忍了三天，本來三天一傳代，這回擴(kuò)大培養(yǎng)，養(yǎng)了6天（期間只補(bǔ)了兩次液）
昨晚看了一下，有一瓶已經(jīng)長了很多了，另一瓶長得一般般

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6樓2011-04-21 10:26:24

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