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111602木蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)
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[交流]
線性化及完整的質(zhì)粒電泳問(wèn)題。 已有8人參與
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最近在做實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，遇到要將質(zhì)粒先線性化，發(fā)現(xiàn)用酶切后電泳，與未酶切的質(zhì)粒相比，跑的速度要快，不知是何原因，這些質(zhì)粒都非空載，有些不理解，一般線性后跑的速度應(yīng)該比超螺旋快才對(duì)啊。請(qǐng)高手指教！ 首先感謝各位的討論和建議。但必須說(shuō)明一點(diǎn)，這個(gè)質(zhì)粒是重組的，而且選擇的酶只有一個(gè)酶切位點(diǎn)，電泳用的是1% AGAROSE GEL. 120V 30MIN.并且可以肯定已經(jīng)被線性化的了。因?yàn)楹罄^實(shí)驗(yàn)如果沒(méi)有被線性化是無(wú)法成功的。 大家的回答都是建立在理論分析基礎(chǔ)上的。我也贊同這一理論，但不知道有沒(méi)有真正做過(guò)這一實(shí)驗(yàn)的朋友，可能我的實(shí)驗(yàn)（電泳）出了問(wèn)題，但希望有實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)的朋友給點(diǎn)意見(jiàn)。 [ Last edited by 111602 on 2011-4-21 at 01:42 ] |
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