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[求助]
DEEG條帶測序問題
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| 各位高手，本人目前正在做DGGE，使用的是銀染進(jìn)行染色，對DGGE電泳單一條帶切割回收后，再擴(kuò)增測序，但是測序結(jié)果有雜峰，說明PCR出來的結(jié)果不是單一條帶，這就很奇怪，因為模板是DGGE的單一條帶。我想請教各位高手，在如何獲得單一條帶這方面,有什么建議么?難道非得進(jìn)行克隆轉(zhuǎn)化測質(zhì)粒么，那對于多條帶圖譜來說，就太麻煩了吧。 |
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2樓2011-04-21 14:27:52
xiadongliang
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4樓2011-04-22 09:13:00
xiadongliang
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5樓2011-04-22 10:42:36
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6樓2011-04-22 11:13:25
按道理來說確實應(yīng)該克隆測序的，不過你也可以嘗試一下這么做：跑完第一次ＤＧＧＥ后，割膠提DNA后，PCR，然后再跑一次ＤＧＧＥ，確定是單一條帶的話再進(jìn)行割膠測序。 7樓2011-04-26 09:51:38
shajunji
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8樓2012-04-21 23:21:38
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