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lhwen182金蟲 (正式寫手)
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[求助]
修復(fù)PCR（reconditioning PCR）
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請教一下，修復(fù)PCR怎么做？看文獻說是將先擴增出的產(chǎn)物稀釋10倍，再在新的反應(yīng)液中進行新的3個循環(huán)的修補擴增。 問：這個稀釋是直接用滅過的雙蒸水稀釋么？稀釋以后的體系又該怎么配置？50μ的體系稀釋后就是500μ了，這個體系該怎么配��？ |
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新人小玥
木蟲 (正式寫手)
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★
西瓜(金幣+5): Good! 2011-04-28 10:21:13
lhwen182(金幣+5): 2011-04-29 13:48:06
lhwen182(金幣+10): 2011-05-06 14:49:30
西瓜(金幣+5): Good! 2011-04-28 10:21:13
lhwen182(金幣+5): 2011-04-29 13:48:06
lhwen182(金幣+10): 2011-05-06 14:49:30
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稀釋10倍用ddH2O就可以。以稀釋后的PCR產(chǎn)物作為模板，PCR體系同原來的體系，再用同程序PCR3個循環(huán)。 你可操作的方法是：將PCR產(chǎn)物取1微升，加入9微升的ddH2O，這就是你新的要進行修復(fù)PCR的模板，所有東西按照原來的體積加。比如原來DNA模板要加3微升，那么修復(fù)PCR的體系中也加入3微升DNA模板（即稀釋后的PCR產(chǎn)物）。 不知道我又沒有說清楚，若有不明白的，請留言給我哈！ |
2樓2011-04-28 09:51:43
lhwen182
金蟲 (正式寫手)
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3樓2011-04-29 13:49:14
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