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奧拓哥銀蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
請(qǐng)教關(guān)于分選SP細(xì)胞時(shí)hoechst染色的問(wèn)題
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| 昨天把準(zhǔn)備好的腫瘤細(xì)胞拿去上流式細(xì)胞儀分選SP細(xì)胞，結(jié)果二維散點(diǎn)圖上提示腫瘤細(xì)胞沒(méi)有染上Hoechst33342. 我是把離心好的細(xì)胞重懸在10%FBS的1640培養(yǎng)基中，然后加Hoechst33342(10mg溶解在100ml PBS中配制，終濃度為5ug/ml)后在培養(yǎng)箱中孵育90分鐘，離心后重懸于2%FBS的PBS中，篩網(wǎng)過(guò)濾后上機(jī)分析。 想請(qǐng)教下可能會(huì)是什么原因?qū)е录?xì)胞沒(méi)有染上Hoechst33342。 |
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