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小小_木蟲木蟲 (小有名氣)
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[求助]
急！互補不回去，應(yīng)該怎么辦？
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| 枯草芽孢桿菌，利用基因同源重組的方法將基因組中的A基因缺失掉，缺失后的性狀比較明顯，抑菌活性明顯下降。但是做互補時，卻始終都互補不回去：我用的是pHY300PLK質(zhì)粒做載體，連入完整的A基因片段后，電擊轉(zhuǎn)入枯草芽孢桿菌菌株中，然后就測定是否互補回去。不知道我的方法是否有誤？懇請高手指點…… |
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★
西瓜(金幣+5, EPI+1): 理論知識和實際經(jīng)驗都很強，有前途~ 2011-04-29 23:49:21
西瓜(金幣+5, EPI+1): 理論知識和實際經(jīng)驗都很強，有前途~ 2011-04-29 23:49:21
| 你先看看這個基因你缺失的部分，是否和別的基因的編碼區(qū)，轉(zhuǎn)錄起始區(qū)，轉(zhuǎn)錄終止區(qū)有重疊，如果有，就很有可能影響了周圍基因的表達；還有和別的基因如果在同一個操縱子內(nèi)，它的缺失也會影響周圍基因的表達，還有個問題，會不會你的基因缺失或者過表達之后的表型是一樣的，我實驗室有個同學(xué)就做了這樣一個基因，它缺失和大量表達的變型是一致的，而少量表達之后可以回復(fù)這個表型。 |
5樓2011-04-29 22:33:19
天使托
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T.Shen
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2樓2011-04-27 12:31:43
小小_木蟲
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，祝工作順利！ 3樓2011-04-27 14:26:56
4樓2011-04-28 13:55:43
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