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康群招新蟲 (初入文壇)
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[求助]
（求助）請問有誰做過水蛭的凝血酶效價(jià)測定 已有2人參與
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請問有誰做過水蛭的凝血酶效價(jià)測定，新手上路，想就試驗(yàn)中出現(xiàn)的幾個(gè)問題請教一下。 1、水蛭藥材（鑒定為螞蝗）按2010版藥典的方法測定凝血酶效價(jià)時(shí)，在加入纖維蛋白原后即出現(xiàn)絮狀沉淀，且粘壁？前后重復(fù)了4次結(jié)果都一樣。而我們做的水蛭水提醇沉的浸膏卻沒有這問題，能正常測定。 2、測定用的Tris-Hcl，生理鹽水，纖維蛋白原，凝血酶都是新配的。 3、原來用的凝血酶有標(biāo)示10單位/mg，現(xiàn)在買的凝血酶只標(biāo)示了560IU/支，請問該怎么配制？纖維蛋白原瓶上標(biāo)示的凝固物含量61%，請問這是指純度嗎？ 高人指點(diǎn)  |
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clcl88
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不知道你找到答案沒有啊？救救我也。。。剛接手做這個(gè)。。。怎么下手啊。。。有相關(guān)分享一下。。。。感激不盡啊。。。。。 
2樓2013-09-03 14:18:34
【答案】應(yīng)助回帖
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試測一下水蛭提取液的PH，可能是因?yàn)樘崛∫旱乃釅A度問題，調(diào)到5.0左右就沒問題了。以前我也遇到過這種問題，你去百度一下水蛭含量測定，有很多文獻(xiàn)是關(guān)于水蛭提取液PH對含量測定影響的研究 至于配制凝血酶溶液的濃度...我這邊也糾結(jié)了很久，最后是這樣干的，先把整瓶凍干粉拿去離心，讓粉都沉在瓶底，然后加1ml生理鹽水，使成560iu/ml，作為貯備液，你可以根據(jù)用量選擇取多少貯備液出來稀釋成10u/ml。至于緩沖液取就直接取纖維白原0.25g，溶于pH7.85的50mL的Tris-HCI緩沖液中，得0.5%的纖維蛋白原溶液。 希望可以幫到你，我也是半桶水，因?yàn)槲疫@邊用的是SIGMA的凝血酶，關(guān)于它濃度的問題我也傷透腦筋，現(xiàn)在還在糾結(jié)，求大神指點(diǎn)�。。� |
3樓2014-06-03 11:13:52
7899014as
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5樓2018-06-06 14:39:22
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