 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 6 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 1618 | 回復(fù): 5 | |||
| 本帖產(chǎn)生 1 個(gè) MolEPI ，點(diǎn)擊這里進(jìn)行查看 | |||
nick.nye-0313銅蟲 (小有名氣)
|
[求助]
關(guān)于westen-blot實(shí)驗(yàn)的具體步驟及實(shí)驗(yàn)中注意的問題，請教！
|
||
| 最近在做westen，在做的過程中有些問題。比如轉(zhuǎn)膜時(shí)間多長為好，1個(gè)小時(shí)？不同的蛋白通路有區(qū)別嗎？還有曝光片子的時(shí)候，多久為好？有詳細(xì)的規(guī)定嗎？還有就是你們大家做完實(shí)驗(yàn)后的這些膠，顯影定影液失效后最后都是如何處理的？定影液里有沒有致癌的物質(zhì)？做實(shí)驗(yàn)的時(shí)候應(yīng)當(dāng)注意些什么事情？小弟初接觸這方面實(shí)驗(yàn)，希望有做過的同仁指點(diǎn)指點(diǎn)，十分感謝！ |
回復(fù)此樓» 收錄本帖的淘帖專輯推薦
 【分子生物】EPI帖 |
» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：實(shí)驗(yàn)器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：和實(shí)驗(yàn)材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有71人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對您同樣有幫助:
- 請教關(guān)于拉曼光譜表面增強(qiáng)計(jì)算和實(shí)驗(yàn)問題，謝謝
已經(jīng)有16人回復(fù)
- 請教DMSO吐溫80等溶劑在藥代實(shí)驗(yàn)中的限量問題！
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 關(guān)于Elisa實(shí)驗(yàn)中吸光度值衰減的問題
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 想請教一下吸附實(shí)驗(yàn)中紅外光譜強(qiáng)度的問題···謝謝
已經(jīng)有10人回復(fù)
- 【求助/交流】Westen blot問題請教
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 【版塊活動(dòng)】關(guān)于有機(jī)實(shí)驗(yàn)中的安全問題，希望大家踴躍參與討論
已經(jīng)有27人回復(fù)
- 【求助】關(guān)于一些實(shí)驗(yàn)中的問題
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 【求助】關(guān)于分子印跡聚合物的吸附實(shí)驗(yàn)中遇到的問題
已經(jīng)有19人回復(fù)
elvias
鐵桿木蟲 (正式寫手)
- MolEPI: 18
- 應(yīng)助: 4 (幼兒園)
- 貴賓: 0.005
- 金幣: 5850.5
- 紅花: 7
- 帖子: 389
- 在線: 91.5小時(shí)
- 蟲號: 302177
- 注冊: 2006-12-02
- 性別: GG
- 專業(yè): 腫瘤免疫
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★
西瓜(金幣+5, EPI+1): 鼓勵(lì)交流 2011-05-02 00:33:55
nick.nye-0313(金幣+20): 2011-05-26 08:55:30
西瓜(金幣+5, EPI+1): 鼓勵(lì)交流 2011-05-02 00:33:55
nick.nye-0313(金幣+20): 2011-05-26 08:55:30
|
1.轉(zhuǎn)膜時(shí)間要看你目的蛋白的大小而定，蛋白分子量越大，轉(zhuǎn)膜的電壓電流要更大，時(shí)間也要更長些，所以沒有定值。 2.不明白你說的蛋白通路是什么意思，按我的理解，只要你通路上的蛋白有變化，并且足夠顯著的話，在westen-blot中是可以顯示出區(qū)別的。 3.曝光時(shí)間沒有一個(gè)定值，如果你的抗體特異性極強(qiáng)，并且你的蛋白豐度極高，比如actin一般我曝光10秒鐘就足夠了，如果你的單擺風(fēng)度低的話就要適當(dāng)延長曝光時(shí)間。 4.我這的膠，以及顯影定影液都集中起來，一起處理。 5.致不致癌我不敢確定的回答，但是肯定對身體不好，需要戴手套。 6.westen-blot需要注意的事情很多，包括跑SDS-PAGE，轉(zhuǎn)膜，孵育，洗滌等等，建議在論壇里找一下以前發(fā)過的流程和注意事項(xiàng)。 |
2樓2011-05-01 22:54:42
西瓜
榮譽(yù)版主 (知名作家)
- MolEPI: 50
- 應(yīng)助: 94 (初中生)
- 貴賓: 3.157
- 金幣: 1849.6
- 散金: 11458
- 紅花: 116
- 沙發(fā): 21
- 帖子: 7553
- 在線: 1449.5小時(shí)
- 蟲號: 271749
- 注冊: 2006-08-13
- 性別: GG
- 專業(yè): 細(xì)胞衰老
- 管轄: 分子生物
3樓2011-05-02 00:35:32
nuoyaeva
鐵桿木蟲 (正式寫手)
- MolEPI: 2
- 應(yīng)助: 9 (幼兒園)
- 金幣: 5132.8
- 帖子: 446
- 在線: 561.5小時(shí)
- 蟲號: 877127
- 注冊: 2009-10-19
- 性別: GG
- 專業(yè): 腫瘤化學(xué)藥物治療
4樓2011-05-03 16:08:36
nick.nye-0313
銅蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 6 (幼兒園)
- 金幣: 55.1
- 紅花: 1
- 帖子: 173
- 在線: 40.5小時(shí)
- 蟲號: 472657
- 注冊: 2007-12-04
- 性別: GG
- 專業(yè): 心腦血管藥物藥理
5樓2011-05-07 10:52:19
食品科學(xué)2012
銅蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 2 (幼兒園)
- 金幣: 179
- 散金: 130
- 紅花: 3
- 帖子: 209
- 在線: 30.7小時(shí)
- 蟲號: 2148321
- 注冊: 2012-11-26
- 性別: GG
- 專業(yè): 細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)
6樓2012-11-29 11:55:57
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 nick.nye-0313 的主題更新
| 6 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 一志愿中海洋材料工程專碩330分求調(diào)劑 +5 | 小材化本科 2026-03-18 | 5/250 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 328求調(diào)劑，英語六級551，有科研經(jīng)歷 +3 | 生物工程調(diào)劑 2026-03-17 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 070303一志愿西北大學(xué)學(xué)碩310找調(diào)劑 +6 | d如愿上岸 2026-03-12 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué) 305求調(diào)劑 +3 | FY_yy 2026-03-14 | 3/150 |
|
|
[考研] 299求調(diào)劑 +5 | △小透明* 2026-03-17 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 環(huán)境工程調(diào)劑 +8 | 大可digkids 2026-03-16 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 268求調(diào)劑 +8 | 一定有學(xué)上- 2026-03-14 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 考研化學(xué)學(xué)碩調(diào)劑，一志愿985 +4 | 張vvvv 2026-03-15 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 材料專碩326求調(diào)劑 +6 | 墨煜姒莘 2026-03-15 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 085600材料與化工求調(diào)劑 +5 | 緒幸與子 2026-03-17 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 26考研求調(diào)劑 +6 | 丶宏Sir 2026-03-13 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 290求調(diào)劑 +6 | 孔志浩 2026-03-12 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 285化工學(xué)碩求調(diào)劑（081700） +9 | 柴郡貓_ 2026-03-12 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 285求調(diào)劑 +6 | ytter 2026-03-12 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 材料與化工 323 英一+數(shù)二+物化，一志愿：哈工大 本人本科雙一流 +4 | 自由的_飛翔 2026-03-13 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 297求調(diào)劑 +4 | 學(xué)海漂泊 2026-03-13 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 材料專碩350 求調(diào)劑 +4 | 王金科 2026-03-12 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 085600材料與化工 309分請求調(diào)劑 +7 | dtdxzxx 2026-03-12 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 一志愿山大07化學(xué) 332分 四六級已過 本科山東雙非 求調(diào)劑！ +3 | 不想理你 2026-03-12 | 3/150 |
|
|
|
[論文投稿]
投稿問題
 5+4
|
星光燦爛xt 2026-03-12 | 6/300 |
|