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苯酚硫酸法葡萄糖的標(biāo)準(zhǔn)曲線
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大家好，我使用以下方法做的標(biāo)準(zhǔn)曲線，但測(cè)出來的曲線變化太大，重復(fù)操作時(shí)，同樣濃度的吸光度能從0.2變到0.6.請(qǐng)問大家有沒有做好的曲線讓我參考一下哦，謝謝啦！ 準(zhǔn)確稱取標(biāo)準(zhǔn)葡聚糖（或葡萄糖）20mg于500ml容量瓶中，加水至刻度，分別吸取0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6及1.8ml,各以蒸餾水補(bǔ)至2.0ml，然后加入6%苯酚1.0ml及濃硫酸5.0ml,搖勻冷卻，室溫放置20分鐘以后于490nm測(cè)光密度，以2.0ml水按同樣顯色操作為空白，橫坐標(biāo)為多糖微克數(shù)，縱坐標(biāo)為光密度值，得標(biāo)準(zhǔn)曲線。 [ Last edited by lovibond on 2011-6-28 at 12:35 ] |
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3樓2011-05-05 20:36:56
kwzhl
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【答案】應(yīng)助回帖
hunxibaba(金幣+1): 2011-05-13 14:15:09
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這是我的標(biāo)曲： 滴加葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液量：0.02 0.04 0.06 0.08 0.1 0.12 0.14 0.16 0.18 0.2 對(duì)應(yīng)吸光值：0.204 0.29 0.392 0.461 0.522 0.63 0.655 0.816 0.799 0.889 y = 3.7994x + 0.1479 R2 = 0.9851 系數(shù)不是很理想，但如果去掉后面幾個(gè)點(diǎn)能到0.994，將就看下吧 另外做這個(gè)標(biāo)曲我發(fā)現(xiàn)過這么幾個(gè)問題： 1.苯酚要現(xiàn)用現(xiàn)配，最好要重蒸 2.有時(shí)發(fā)現(xiàn)連葡標(biāo)都要重配，過段時(shí)間測(cè)發(fā)現(xiàn)變動(dòng)很大，個(gè)人分析認(rèn)為可能是瓶子中有微生物利用了葡萄糖導(dǎo)致含量下降 3.滴加各種溶液時(shí)要準(zhǔn)確，不然會(huì)導(dǎo)致一些波動(dòng)，影響相關(guān)系數(shù) 4.最好用一個(gè)比色皿去比色，減少誤差。 |
2樓2011-05-05 20:32:36
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4樓2011-06-14 16:01:42
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5樓2011-06-14 16:09:06
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