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夢想與現(xiàn)實共舞木蟲 (正式寫手)
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[求助]
FITC標(biāo)記蛋白中的Sephadex G25柱
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| 我想用熒光標(biāo)記蛋白,現(xiàn)在從網(wǎng)上找到一些實驗方法大致相同,其中最后一步都是用Sephadex G25柱除去游離熒光素,有的在這一步前面有加透析,有的沒有。我現(xiàn)在的疑問是Sephadex G25柱除了可以除去游離的熒光素,還有什么作用?我知道透析可以將小分子的FITC除去,如果Sephadex G25柱僅是除FITC,那么用透析不就可以了嗎?非得要用Sephadex G25柱嗎? |
參考標(biāo)準(zhǔn) |
鐵蟲 (小有名氣)
木蟲 (著名寫手)
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G25柱和透析的目的都是除去沒修飾到蛋白上的游離熒光分子,二者用一個就行了 G25柱實驗時間比較短,但裝柱,和檢測都比較麻煩,最好有AKTA儀器做起來比較方便 透析做起來比較簡單,根據(jù)你的蛋白和熒光素的分子量選擇適當(dāng)分子量的透析袋,透析1-2天也幾乎能去除游離的熒光分子,透析溶液要用蛋白的緩沖液,剛開始透析的時候多換幾次液 |

木蟲 (著名寫手)

木蟲 (正式寫手)
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