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darswinxie新蟲 (小有名氣)
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[求助]
液相 流動(dòng)相配制出現(xiàn)問(wèn)題了。怎么辦？？？
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關(guān)于流動(dòng)相配制問(wèn)題 各位大俠好。 本人現(xiàn)在在用HPLC-ECD檢測(cè)6-OHDA，流動(dòng)相是：25mM檸檬酸，125mM磷酸鈉（文獻(xiàn)中寫的是sodium phosphate），100mg/lEDTA，30mg/lSOS，配置好后用磷酸調(diào)節(jié)pH至2.5（我們實(shí)際操作中，比2.5高）. 現(xiàn)有問(wèn)題如下： 1.關(guān)于pH:我第一次檢測(cè)的時(shí)候，調(diào)節(jié)pH至3.5，但是出峰時(shí)間隨著時(shí)間的進(jìn)行也向后推移了，而且是每進(jìn)一針都向后退0.1-0.2分鐘，推測(cè)可能是由于pH變化導(dǎo)致的，于是3天后又測(cè)那瓶流動(dòng)相的pH為3.8，又過(guò)了三天再測(cè)變?yōu)?.2.可是我第二次測(cè)時(shí)候，當(dāng)天做完實(shí)驗(yàn)測(cè)得pH值和我第二天早上測(cè)得pH值幾乎沒有變化！于是我又迷茫了！莫名奇妙。于是又找其他原因。 2.我用sodium phosphate，瓶子上寫的是這個(gè)，但是化學(xué)式是磷酸二氫鈉。但是就緩沖對(duì)來(lái)說(shuō)，是不是沒有太大影響？另外在配置流動(dòng)相的時(shí)候有沒有什么注意事項(xiàng)？比如操作有沒有什么規(guī)定？（我是先放檸檬酸，再放磷酸二氫鈉，然后讓EDTA，最后放SOS，倒入蒸餾水定容至1升，然后調(diào)節(jié)pH,不知道是不是操作有問(wèn)題？） 多謝 |
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