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【求助】求助：液相，流動(dòng)相問(wèn)題？ 已有7人參與
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WATERS HPLC不知道出現(xiàn)了什么問(wèn)題，峰面積重現(xiàn)性很不好。 用了兩個(gè)樣品，樣品名保密，條件分別是(1)C18柱;流動(dòng)相：甲醇-水 70：30;流速：1.0ml/min;室溫;進(jìn)樣量：20微升(2)C18柱;流動(dòng)相：甲醇-水-冰醋酸 40：60：0.02%;流速：1.0ml/min;室溫;進(jìn)樣量：20微升。這兩個(gè)樣品的方法學(xué)已經(jīng)經(jīng)過(guò)確認(rèn)是可以完全分離樣品的。兩個(gè)樣品的結(jié)構(gòu)不相似，分子量不大。峰形還可以的，一個(gè)略拖尾，對(duì)稱因子為1.18，另一個(gè)更好一些，均沒(méi)有過(guò)載現(xiàn)象。峰面積自動(dòng)積分和手動(dòng)積分RSD約為7%-10%。 上禮拜工程師來(lái)過(guò)，檢查結(jié)果表明，自動(dòng)進(jìn)樣針的進(jìn)樣量是準(zhǔn)確穩(wěn)定的。 另外，實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，柱子的壓差比較大，并且不穩(wěn)定，在流速為 1.0ml/min時(shí)約80psi。曾經(jīng)懷疑是系統(tǒng)內(nèi)混入了氣體，但是經(jīng)過(guò)長(zhǎng)時(shí)間低流速?zèng)_洗，重現(xiàn)性仍然不好。系統(tǒng)內(nèi)和柱子也沒(méi)有漏液的現(xiàn)象。 這究竟是為什么呢???急切期待各位高人的指教!!! |
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2樓2010-05-26 10:00:31
mytll
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3樓2010-05-26 10:01:18
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流動(dòng)相的脫氣沒(méi)有出現(xiàn)問(wèn)題，也在懷疑是系統(tǒng)內(nèi)的氣泡，正沖著 忽大忽小的，沒(méi)有什么規(guī)律……懷疑是系統(tǒng)內(nèi)氣泡，正在沖，下午再做一下重現(xiàn)性看看結(jié)果如何吧！其實(shí)前面用的兩個(gè)樣品穩(wěn)定性也不錯(cuò)的，下午又換了一個(gè)更穩(wěn)定的，但愿會(huì)好吧！ 同一根柱子，用甲醇-乙腈-水為流動(dòng)相，流速為1.0ml/min，柱子的壓差為33psi左右，用純甲醇，流速為1.0ml/min，柱子的壓差為 25psi左右，可是一換成甲醇-水和甲醇-水-冰醋酸，柱子的壓差就馬上變的很高了，并且在更換流動(dòng)相的過(guò)程中，柱子沒(méi)有動(dòng)過(guò)……這是為什么呢？ |
4樓2010-05-26 13:44:08
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9樓2010-05-29 10:53:24
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