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[求助]
植物克隆,表達(dá)相關(guān)的幾個(gè)問(wèn)題
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請(qǐng)問(wèn)各位牛人們,我目前研究植物轉(zhuǎn)基因,我剛?cè)腴T(mén),請(qǐng)問(wèn): 1.植物基因的載體,質(zhì)粒,都有哪些? 2.是選擇雙元載體,將目的基因轉(zhuǎn)進(jìn)去后,直接農(nóng)桿菌表達(dá)好了, 還是先轉(zhuǎn)到克隆載體里,再轉(zhuǎn)到表達(dá)載體好?能推薦一些常用的,而且流行的嗎? |
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zhangtao0502
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★
amisking(金幣+2): 鼓勵(lì)應(yīng)助 2011-05-29 20:09:31
perfectyw(金幣+1): 謝謝啦～～不知道蟲(chóng)友這有木有pBI121 2011-05-30 09:06:08
amisking(金幣+2): 鼓勵(lì)應(yīng)助 2011-05-29 20:09:31
perfectyw(金幣+1): 謝謝啦～～不知道蟲(chóng)友這有木有pBI121 2011-05-30 09:06:08
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僅回答一下你第二個(gè)問(wèn)題 首先你得確定你的目的片段，是從別的載體上切下來(lái)用還是通過(guò)PCR擴(kuò)出來(lái)，前者那應(yīng)該是序列確定的了，可以直接連雙元載體，后者應(yīng)該先測(cè)序，確定序列后再轉(zhuǎn)雙元載體，所以應(yīng)該先連測(cè)序載體了。 |
2樓2011-05-29 18:58:06
lihuaannie
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★
perfectyw(金幣+1): 恩，明白了，謝謝啊，測(cè)序載體有哪些？直接用cDNA測(cè)序不行么？ 2011-05-31 22:16:53
silicare(金幣+3): 鼓勵(lì)新蟲(chóng)發(fā)帖交流，歡迎常來(lái)生物綜合版 2011-06-07 18:45:09
perfectyw(金幣+1): 恩，明白了，謝謝啊，測(cè)序載體有哪些？直接用cDNA測(cè)序不行么？ 2011-05-31 22:16:53
silicare(金幣+3): 鼓勵(lì)新蟲(chóng)發(fā)帖交流，歡迎常來(lái)生物綜合版 2011-06-07 18:45:09
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植物的載體運(yùn)用的有很多，像pCAMBIA系列的是現(xiàn)在比較通用的。 做表達(dá)載體，首先你的確定你的目的片段正確才行，所以同意樓上的觀點(diǎn)，先在測(cè)序載體里面做，然后再轉(zhuǎn)到雙元表達(dá)載體，這個(gè)載體構(gòu)建好后，最好也測(cè)序驗(yàn)證一下。 |
3樓2011-05-31 13:59:41
dream-fish
銀蟲(chóng) (小有名氣)
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★
silicare(金幣+3, EPI+1): 鼓勵(lì)發(fā)帖交流，歡迎常來(lái)生物綜合版 2011-06-07 18:45:29
perfectyw(金幣+1): 謝謝啊～請(qǐng)問(wèn)ocs可以作為終止子嗎？ 2011-06-07 23:33:04
silicare(金幣+3, EPI+1): 鼓勵(lì)發(fā)帖交流，歡迎常來(lái)生物綜合版 2011-06-07 18:45:29
perfectyw(金幣+1): 謝謝啊～請(qǐng)問(wèn)ocs可以作為終止子嗎？ 2011-06-07 23:33:04
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載體嘛，pCAMBIA系列的很好用，還有就是Gateway系列的載體，只要你實(shí)驗(yàn)室有用該系統(tǒng)。還有常用的什么T載體的很實(shí)用。 一般來(lái)說(shuō)，克隆到一個(gè)基因之后最好裝到T載體，因?yàn)槟憧赡芎竺嫘枰獦?gòu)一系列的載體，在轉(zhuǎn)植物之前一定要認(rèn)真測(cè)序，因?yàn)橹参锏纳L(zhǎng)周期比較長(zhǎng)，如果移碼，你就傷不起啊 |
4樓2011-06-07 16:41:45
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5樓2011-07-10 16:11:51
6樓2011-11-21 10:55:15
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