 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 1081 | 回復: 4 | ||
[求助]
大家評論下這個不倫不類的銀染方法
|
|
銀染法分為強堿法和弱堿法，我用師姐之前做過的方法，具體描述如下，大家評論下這個不倫不類的方法（既非強堿法亦非弱堿法啊，傷不起呀） 電泳后采用銀染的方法，銀染[12]主要步驟：(1)去離子水洗脫3min；(2)10%乙酸固定10min；(3)去離子水洗脫2min；(4)銀染15min(0.1%AgNO3)；(5)去離子水洗脫0.5min；(6)顯影液脫色6min（16gNaOH， 8ml37%甲醛溶液，用ddH2O定溶至1L）；(7)10%乙酸固定1min；(8)去離子水洗脫，最后用相機或是在凝膠成像系統(tǒng)中拍照。 PS：順便問下，甲醛的作用是什么？一般要加多少量？還有，弱堿法底色是淺，但會不會造成條帶分辨率不是很好呢？ 小女子這廂謝過大家(*^__^*) 嘻嘻 |
回復此樓» 猜你喜歡
蛋白質(zhì)檢測：精準分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之小鼠實驗：嚴謹設(shè)計，解析生命機制的重要載體
已經(jīng)有0人回復
-
化學工程及工業(yè)化學論文潤色/翻譯怎么收費?
已經(jīng)有239人回復
-
不合理蛙科研實驗之重金屬檢測：精準篩查，守護健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標南京
已經(jīng)有0人回復
-
留學--博士招生
已經(jīng)有15人回復
-
化學工程，本211，求調(diào)劑，ab區(qū)不限
已經(jīng)有4人回復
» 本主題相關(guān)價值貼推薦，對您同樣有幫助:
- 轉(zhuǎn)一篇——李劼《王國維自沉的文化芬芳》
已經(jīng)有14人回復
- 大家說說你們做聚丙烯酰胺凝膠電泳時銀染法的小竅門啦。
已經(jīng)有15人回復
maizecotton
金蟲 (正式寫手)
- 應助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 609.9
- 散金: 122
- 紅花: 3
- 帖子: 376
- 在線: 1064.8小時
- 蟲號: 1042697
- 注冊: 2010-06-17
- 專業(yè): 作物種質(zhì)資源與遺傳育種學
2樓2011-06-03 12:45:15
xiadongliang
金蟲 (正式寫手)
- MolEPI: 3
- 應助: 64 (初中生)
- 金幣: 973.3
- 散金: 1299
- 紅花: 15
- 帖子: 759
- 在線: 361.7小時
- 蟲號: 433819
- 注冊: 2007-08-18
- 性別: GG
- 專業(yè): 環(huán)境微生物學
【答案】應助回帖
★ ★ ★
西瓜(金幣+3): 歡迎應助。能否順便回答下樓主順便問的問題呢，嘿嘿 2011-06-03 18:31:39
墨池(金幣+1): 2011-06-03 20:32:37
西瓜(金幣+3): 歡迎應助。能否順便回答下樓主順便問的問題呢，嘿嘿 2011-06-03 18:31:39
墨池(金幣+1): 2011-06-03 20:32:37
|
1. 固定液（乙醇 50 mL，冰醋酸2.5 mL）固定15 min 2. Milli-Q純水清洗，20 s和2 min各一次 3. 銀染液（硝酸銀1 g，37%甲醛0.75 mL）染色15 min 4. Milli-Q純水清洗，20 s和2 min各一次 5. 顯色液（氫氧化鈉7.5 g，37%甲醛2.5 mL）顯色5-7 min 6. 最后用終止液（乙醇50 mL，冰醋酸2.5 mL）終止反應 |
3樓2011-06-03 13:58:22
xiadongliang
金蟲 (正式寫手)
- MolEPI: 3
- 應助: 64 (初中生)
- 金幣: 973.3
- 散金: 1299
- 紅花: 15
- 帖子: 759
- 在線: 361.7小時
- 蟲號: 433819
- 注冊: 2007-08-18
- 性別: GG
- 專業(yè): 環(huán)境微生物學
4樓2011-06-03 13:59:38
terry130
木蟲 (正式寫手)
- MolEPI: 5
- 應助: 0 (幼兒園)
- 貴賓: 0.001
- 金幣: 2283.9
- 散金: 19
- 紅花: 9
- 帖子: 388
- 在線: 39.3小時
- 蟲號: 313316
- 注冊: 2007-02-24
- 性別: GG
- 專業(yè): 細胞死亡
【答案】應助回帖
★ ★ ★ ★
西瓜(金幣+4): Good！ 2011-06-03 18:36:30
墨池(金幣+1): 2011-06-03 20:32:27
西瓜(金幣+4): Good！ 2011-06-03 18:36:30
墨池(金幣+1): 2011-06-03 20:32:27
|
下面是我們實驗室用的印染protocol，很好用，給你做參考 Fresh Solutions： 0.02% Sodium Thiosulfate (Na2S2O3) 0.1% AgNO3 for minigel and 0.15% for large gel. Stored in 4ºC before use. 2% Na2CO3 + 0.04% formaldehide. Prepare fresh. Note: Wear clean gloves when handling all materials. Take special care to touch only the same corner of the gel to prevent staining artifact. Clean glasses very carefuly when preparing the gel. Place gel in clean glass container before staining Staining steps (for minigels). Every step needs gently shaking. Fixation: 200ml 50% methanol + 5% acetic acid for 20min or ON (1 hour for large gels). Rinse 1: 200ml 50% methanol for 10min (20min for large gels). Rinse 2: 200ml H2O for 10min (15min for large gels). Sensitization: 200ml 0.02% Na2S2O3 1min. Rinse:H2O 2 x 1min. Stain: 200ml chilled 0.1% AgNO3 for minigel (0.15% for large gel) for 20min. Keep from light. Rinse: H2O 2 x 1min. Develop: 2% Na2CO3 + 0.04% formaldehide with intensive shaking. After 20-30 seconds (solution turns yellow), replace it with new develop solution. Develop to the degree you want. You can change develop solution again after 2-3minutes. Stop: 5% acetic acid 2 x 3min. Store: 1% acetic acid at 4ºC, or rinse gel with same solution and then with H2O. If you need material for Mass Spectrometry cut the bands and store in 1.5ml plastic tubes at 4ºC. |
5樓2011-06-03 16:21:15
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 墨池 的主題更新
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 材料與化工304求B區(qū)調(diào)劑 +3 | 邱gl 2026-03-26 | 5/250 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 環(huán)境專碩324分求調(diào)劑推薦 +5 | 軒小寧—— 2026-03-26 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 297求調(diào)劑 +3 | 田洪有 2026-03-26 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 打過很多競賽，085406控制工程300分，求調(diào)劑 +3 | askeladz 2026-03-26 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 316求調(diào)劑 +9 | 梁茜雯 2026-03-19 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 303求調(diào)劑 +6 | 藍山月 2026-03-25 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 材料與化工304求B區(qū)調(diào)劑 +3 | 邱gl 2026-03-25 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +3 | 李李不服輸 2026-03-25 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 0856材料專碩353求調(diào)劑 +6 | NIFFFfff 2026-03-20 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 調(diào)劑 +4 | 13853210211 2026-03-24 | 4/200 |
|
|
|
[有機交流]
 有機合成求助
 20+3
|
FENGSHUJEI 2026-03-23 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +5 | 林之夕 2026-03-24 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 080500求調(diào)劑 +3 | zzzzfan 2026-03-24 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 321求調(diào)劑 +4 | Ymlll 2026-03-24 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 277分求調(diào)劑，跨調(diào)材料 +3 | 考研調(diào)劑lxh 2026-03-24 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 344求調(diào)劑 +3 | desto 2026-03-24 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 一志愿山東大學藥學學碩求調(diào)劑 +3 | 開開心心沒煩惱 2026-03-23 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 一志愿武理材料工程348求調(diào)劑 +6 | ￣^￣゜汗 2026-03-19 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 材料求調(diào)劑 +5 | @taotao 2026-03-21 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 材料與化工（0856）304求 B區(qū) 調(diào)劑 +3 | 邱gl 2026-03-21 | 3/150 |
|