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jingzixy新蟲 (小有名氣)
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[求助]
純化后酶切產(chǎn)物的保存
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| 我想問一下,雙酶切產(chǎn)物(載體、目的基因)純化回收后可在-20保存多長時(shí)間?十分感謝 |
榮譽(yù)版主 (知名作家)
至尊木蟲 (著名寫手)
專家顧問 (職業(yè)作家)
T.Shen
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專家經(jīng)驗(yàn): +57 |

新蟲 (小有名氣)
新蟲 (小有名氣)
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你好,樓主,不好意思這么晚了才告訴你連接結(jié)果! 我的目的片段是現(xiàn)用現(xiàn)切的,只有載體是10年8月份酶切后-20保存的,期間凍融過2次,前兩天的連接結(jié)果(Fermetos的T4連接酶 20vl體系)16度連接2小時(shí),轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21,只長出了3個(gè)轉(zhuǎn)化子,不過還好PCR篩選都是陽性。 鑒于BL21的高速成長的特性,長3個(gè)轉(zhuǎn)化子實(shí)屬轉(zhuǎn)化效率低下導(dǎo)致!所以,縱然有陽性克隆,純化后的酶切產(chǎn)物還是用新的好,畢竟不麻煩,快速酶切幾分鐘,泡個(gè)電泳幾分鐘而已! |
金蟲 (正式寫手)

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