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jingzixy新蟲 (小有名氣)
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[求助]
純化后酶切產(chǎn)物的保存
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| 我想問一下，雙酶切產(chǎn)物（載體、目的基因）純化回收后可在-20保存多長時間？十分感謝 |
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★ ★ ★
西瓜(金幣+3): 鼓勵 2011-06-16 11:46:28
西瓜(金幣+3): 鼓勵 2011-06-16 11:46:28
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你好，樓主，不好意思這么晚了才告訴你連接結(jié)果！ 我的目的片段是現(xiàn)用現(xiàn)切的，只有載體是10年8月份酶切后-20保存的，期間凍融過2次，前兩天的連接結(jié)果（Fermetos的T4連接酶 20vl體系）16度連接2小時，轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21，只長出了3個轉(zhuǎn)化子，不過還好PCR篩選都是陽性。 鑒于BL21的高速成長的特性，長3個轉(zhuǎn)化子實屬轉(zhuǎn)化效率低下導(dǎo)致！所以，縱然有陽性克隆，純化后的酶切產(chǎn)物還是用新的好，畢竟不麻煩，快速酶切幾分鐘，泡個電泳幾分鐘而已！ |
9樓2011-06-16 10:17:48
2樓2011-06-12 17:23:17
西瓜
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3樓2011-06-12 17:39:10
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4樓2011-06-12 20:06:20
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