版塊導(dǎo)航: 正在加載中...

應(yīng)《網(wǎng)絡(luò)安全法》要求，自2017年10月1日起，未進(jìn)行實(shí)名認(rèn)證將不得使用互聯(lián)網(wǎng)跟帖服務(wù)。為保障您的帳號(hào)能夠正常使用，請(qǐng)盡快對(duì)帳號(hào)進(jìn)行手機(jī)號(hào)驗(yàn)證，感謝您的理解與支持！

24小時(shí)熱門版塊排行榜

返回列表

蘇拉的世界

金蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)

BioEPI: 1
應(yīng)助: 10 (幼兒園)
金幣: 930.2
帖子: 2437
在線: 359.4小時(shí)
蟲(chóng)號(hào): 1235093

[交流] 雙酶切時(shí)間怎么確定

我自己在Prok2的基礎(chǔ)上構(gòu)建的載體，用Xbal 1和BamH1雙酶切，20ul的體系，要切多長(zhǎng)時(shí)間比較合適呢，2個(gè)小時(shí)，還是三個(gè)小時(shí)？有做過(guò)的嗎？指點(diǎn)一下

回復(fù)此樓

» 猜你喜歡

312求調(diào)劑已經(jīng)有7人回復(fù)
化學(xué)工程321分求調(diào)劑已經(jīng)有16人回復(fù)
280求調(diào)劑已經(jīng)有3人回復(fù)
266求調(diào)劑已經(jīng)有7人回復(fù)
工科材料085601 279求調(diào)劑已經(jīng)有5人回復(fù)
環(huán)境工程調(diào)劑已經(jīng)有8人回復(fù)
302求調(diào)劑已經(jīng)有9人回復(fù)
297求調(diào)劑已經(jīng)有4人回復(fù)
298-一志愿中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)-求調(diào)劑已經(jīng)有4人回復(fù)
焦慮已經(jīng)有10人回復(fù)

» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:

雙酶切問(wèn)題已經(jīng)有15人回復(fù)
雙酶切已經(jīng)有24人回復(fù)
求助雙酶切驗(yàn)證陽(yáng)性克隆的問(wèn)題已經(jīng)有12人回復(fù)
【求助/交流】雙酶切大問(wèn)題已經(jīng)有14人回復(fù)
【求助/交流】雙酶切求助已經(jīng)有19人回復(fù)
【求助/交流】雙酶切的問(wèn)題已經(jīng)有24人回復(fù)
【求助/交流】雙酶切質(zhì)粒后，目的條帶淺且前方有模糊亮帶已經(jīng)有12人回復(fù)
【求助/交流】雙酶切的問(wèn)題哦已經(jīng)有18人回復(fù)

» 搶金幣啦！回帖就可以得到:

查看全部散金貼

1樓 2011-06-13 15:58:02

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

空谷幽風(fēng)

金蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)

應(yīng)助: 13 (小學(xué)生)
貴賓: 0.05
金幣: 1106.1
帖子: 615
在線: 116.5小時(shí)
蟲(chóng)號(hào): 714271

★ ★ ★
蘇拉的世界(金幣+1):謝謝參與
lstt09nk(金幣+2): 感謝參與 2011-06-14 07:43:44

這兩個(gè)酶的最適溫度都是37℃，一般酶切2h足夠了，如果兩個(gè)酶最適酶切溫度不一樣的話一定要分開(kāi)酶切

贊一下(2人)

回復(fù)此樓

2樓2011-06-13 16:12:24

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

蘇拉的世界

金蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)

BioEPI: 1
應(yīng)助: 10 (幼兒園)
金幣: 930.2
帖子: 2437
在線: 359.4小時(shí)
蟲(chóng)號(hào): 1235093

引用回帖:

Originally posted by 空谷幽風(fēng) at 2011-06-13 16:12:24:
這兩個(gè)酶的最適溫度都是37℃，一般酶切2h足夠了，如果兩個(gè)酶最適酶切溫度不一樣的話一定要分開(kāi)酶切

倆酶一個(gè)是37度的，一個(gè)是30度的，用30度進(jìn)行酶切的

贊一下

回復(fù)此樓

3樓2011-06-13 17:34:06

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

lxj341401

至尊木蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)

BioEPI: 1
應(yīng)助: 388 (碩士)
貴賓: 0.238
金幣: 17138.7
帖子: 2251
在線: 712.4小時(shí)
蟲(chóng)號(hào): 111074

★ ★
蘇拉的世界(金幣+1):謝謝參與
lstt09nk(金幣+1): 是的，跟酶量也有關(guān)系啊 2011-06-14 07:45:31

跟底物也就是DNA的量還有關(guān)系的。

贊一下(2人)

回復(fù)此樓

4樓2011-06-13 20:26:11

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

xuexue1204

銅蟲(chóng) (小有名氣)

應(yīng)助: 9 (幼兒園)
金幣: 168.5
帖子: 103
在線: 50小時(shí)
蟲(chóng)號(hào): 1165636

★ ★ ★
蘇拉的世界(金幣+1):謝謝參與
lstt09nk(金幣+2): 歡迎交流 2011-06-14 07:46:36

兩個(gè)酶可以分開(kāi)切的，你可以先同時(shí)切，切完跑膠看看，如果切不開(kāi)的話，就分開(kāi)切試試，一般不會(huì)有太大問(wèn)題的

贊一下(3人)

回復(fù)此樓

5樓2011-06-13 20:46:24

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

wutongyu77

銅蟲(chóng) (初入文壇)

應(yīng)助: 0 (幼兒園)
金幣: 67.2
帖子: 23
在線: 5.7小時(shí)
蟲(chóng)號(hào): 1299149

★
蘇拉的世界(金幣+1):謝謝參與

我覺(jué)得：加入的順序很關(guān)鍵，先加水，再加buffer,然后質(zhì)粒模板，最后加內(nèi)切酶，酶切3小時(shí)，模板加的稍微多點(diǎn)，回收時(shí)每個(gè)點(diǎn)樣孔加50微升，效果就很好了。

贊一下(1人)

回復(fù)此樓

6樓2011-06-15 10:58:23

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

feng__

金蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)

應(yīng)助: 1 (幼兒園)
金幣: 882.6
帖子: 1534
在線: 312.5小時(shí)
蟲(chóng)號(hào): 1061078

★
蘇拉的世界(金幣+1):謝謝參與

分開(kāi)i切吧

回復(fù)此樓

7樓2011-06-15 11:11:54

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

jia1012428

銅蟲(chóng) (小有名氣)

BioEPI: 1
應(yīng)助: 0 (幼兒園)
金幣: 99.3
帖子: 217
在線: 23.1小時(shí)
蟲(chóng)號(hào): 577116

★
小木蟲(chóng)(金幣+0.5):給個(gè)紅包，謝謝回帖

加試劑先后順序沒(méi)關(guān)系，只要混勻就行了，如果2個(gè)酶在通用緩沖液里的酶切效率都是100%，那2h就夠了，不放心可以延長(zhǎng)時(shí)間，不要超過(guò)4h。

贊一下(1人)

回復(fù)此樓

8樓2011-06-15 19:53:26

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

great4591

銀蟲(chóng) (初入文壇)

應(yīng)助: 1 (幼兒園)
金幣: 277.5
帖子: 40
在線: 39.5小時(shí)
蟲(chóng)號(hào): 1323848

★
小木蟲(chóng)(金幣+0.5):給個(gè)紅包，謝謝回帖

酶切不用那么長(zhǎng)時(shí)間，應(yīng)該根據(jù)酶單位的定義來(lái)就行，一般37度一個(gè)小時(shí)就行，關(guān)鍵是訂好模板量

贊一下(1人)

回復(fù)此樓

9樓2011-06-15 23:04:46

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

qdwmq

木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)

應(yīng)助: 6 (幼兒園)
金幣: 1718.2
帖子: 687
在線: 115.1小時(shí)
蟲(chóng)號(hào): 369270

★
小木蟲(chóng)(金幣+0.5):給個(gè)紅包，謝謝回帖

與試劑的添加順序無(wú)關(guān)，一般3h足夠，NEB的Timesaver的話5min。

贊一下(1人)

回復(fù)此樓

10樓2011-06-15 23:23:11

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn) 我要訂閱樓主蘇拉的世界的主題更新

返回列表

普通表情龍兔虎貓高級(jí)回復(fù) (可上傳附件)

最具人氣熱帖推薦 [查看全部]		作者	回/看	最后發(fā)表

[考研] 工科材料085601 279求調(diào)劑 +5	困于星晨 2026-03-17	5/250	2026-03-18 09:39 by zhukairuo
[考研] 301求調(diào)劑 +9	yy要上岸呀 2026-03-17	9/450	2026-03-18 08:58 by 無(wú)際的草原
[考研] 268求調(diào)劑 +8	一定有學(xué)上- 2026-03-14	9/450	2026-03-17 17:47 by laoshidan
[考研] 344求調(diào)劑 +4	knight344 2026-03-16	4/200	2026-03-17 17:27 by ruiyingmiao
[考研] 材料專碩326求調(diào)劑 +6	墨煜姒莘 2026-03-15	7/350	2026-03-17 17:10 by ruiyingmiao
[考研] 26考研求調(diào)劑 +6	丶宏Sir 2026-03-13	6/300	2026-03-17 16:13 by 醉在風(fēng)里
[考博] 26申博 +4	八旬速覽 2026-03-16	4/200	2026-03-17 13:00 by 輕松不少隨
[考研] 211本，11408一志愿中科院277分，曾在中科院自動(dòng)化所實(shí)習(xí) +6	Losir 2026-03-12	7/350	2026-03-17 12:09 by danranxie
[考研] 一志愿南京大學(xué)，080500材料科學(xué)與工程，調(diào)劑 +4	Jy? 2026-03-16	4/200	2026-03-17 11:02 by gaoqiong
[考研] 271求調(diào)劑 +12	生如夏花… 2026-03-11	14/700	2026-03-17 10:56 by lovewei0727
[考研] 304求調(diào)劑 +4	ahbd 2026-03-14	4/200	2026-03-16 16:48 by 我的船我的海
[考研] 0703化學(xué)調(diào)劑 +6	妮妮ninicgb 2026-03-15	9/450	2026-03-16 16:40 by houyaoxu
[考研] 285求調(diào)劑 +6	ytter 2026-03-12	6/300	2026-03-16 15:05 by njzyff
[考研] 一志愿華中師范071000，325求調(diào)劑 +6	RuitingC 2026-03-12	6/300	2026-03-16 14:50 by 可淡不可忘
[考研] 265求調(diào)劑 +4	威化餅07 2026-03-12	4/200	2026-03-14 17:23 by userper
[考研] 材料與化工（0856）304求B區(qū)調(diào)劑 +6	邱gl 2026-03-12	7/350	2026-03-13 23:24 by 邱gl
[考研] 26調(diào)劑/材料/英一數(shù)二/總分289/已過(guò)A區(qū)線 +6	步川酷紫123 2026-03-13	6/300	2026-03-13 21:59 by 星空星月
[考研] 工科，求調(diào)劑 +3	我887 2026-03-11	3/150	2026-03-13 21:39 by JourneyLucky
[考研] 290求調(diào)劑 +7	ADT 2026-03-12	7/350	2026-03-13 15:17 by JourneyLucky
[考研] 308求調(diào)劑 +3	是Lupa啊 2026-03-12	3/150	2026-03-13 14:30 by 求調(diào)劑zz

24小時(shí)熱門版塊排行榜

[交流] 雙酶切時(shí)間怎么確定

» 猜你喜歡

» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:

» 搶金幣啦！回帖就可以得到: 查看全部散金貼

» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:

» 搶金幣啦！回帖就可以得到:

查看全部散金貼