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Western Blot 轉(zhuǎn)膜相關(guān)問題
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剛剛接觸實驗，最近Western總是在轉(zhuǎn)膜上出問題。 我們用的是NC膜，濕轉(zhuǎn)，100V，1.5h。 10*轉(zhuǎn)膜液：tris 151.1g，甘氨酸30.3g，定容至1000ml 最開始幾次，用之前剩下的10*轉(zhuǎn)膜液，一切正常，起始電壓就能到達100V，電流在250mA，最后電流也不超過300mA。 自己配了一次轉(zhuǎn)膜液后，電壓一開始總是不能達到100V（90左右），就自動轉(zhuǎn)成恒流了（我設(shè)置了最高電流300mV），今晚上更過分，電壓只能到達70V，前10多分鐘，電壓逐漸下降到50V，之后慢慢上升最后維持在80V上下。 我轉(zhuǎn)了2個小時，看maker的效果也還是不錯。 我還是比較疑惑，為什么會有這樣的電壓變化。 轉(zhuǎn)膜液有問題，還是溫度，最開始轉(zhuǎn)膜液溫度稍高，慢慢被周圍冰浴降低，電壓上升？ 謝謝 |
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cdl007
木蟲 (正式寫手)
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3樓2011-06-18 19:26:22
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2樓2011-06-18 18:05:59
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