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xiaohei504888銅蟲 (小有名氣)
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[求助]
求助，6g樣品,怕?lián)p失，如何分離？
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我是新手，第一次過柱分離，有很多問題向大家請教。 手頭現(xiàn)有6g樣品，是75%乙醇提取后，乙酸乙酯的萃取層。我想要的目標產(chǎn)物只能用活性檢測來確定。 1)跑了tlc挑選系統(tǒng)，用過PE-CHCL3, EtOAc-MeOH， hexan-acetone。PE-CHCL3沒有跑開，就換作EtOAc-MeOH，EtOAc-MeOH的點跑得分不開，很大的拖尾，就換成hexan-acetone，結(jié)果如照片所示。第一張是熒光254nm,第二張是熒光365nm（板子上標的是H:M，標錯了，應(yīng)該是H:A）。請問這樣可以用來作為上柱洗脫劑的條件了嗎？如果梯度洗脫的話，要怎樣來安排洗脫的梯度？還有硅膠溶脹用什么試劑比較好？ 2)現(xiàn)在想過硅膠柱。實驗室硅膠是230-400目的。實驗室柱子型號有3種：2.7×40； 1.9×40； 3.5×80。請問用什么試劑溶脹硅膠？根據(jù)我的樣品量，用哪種柱子比較合適？ 3）因為不知道目標產(chǎn)物的具體位置，只能梯度洗脫后，檢測活性。在網(wǎng)上也看了一些，有的人用砍斷洗脫，說是節(jié)約試劑和時間，請教這個砍斷洗脫是什么意思？還有的人用A100-A99B1-A98B2-A95B5-A90B10-A70B30-A50B50-B100 梯度洗脫，請問哪種洗脫方式要好些？ 謝謝，希望有經(jīng)驗的高手不吝賜教。 [ Last edited by xiaohei504888 on 2011-6-15 at 13:41 ] |
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xiaohei504888
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