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bear0329金蟲 (正式寫手)
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[求助]
16srDNA PCR擴增問題，幫忙分析下原因
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PCR體系： 總體積 30 μl 10×Buffer 3 μl dNTP(0.25 mM) 1.5 μl Taq DNA polymerase 0.3 μl 27F(25μM) 1 μl 907R(25μM) 1 μl BSA 0.2 μl 模板DNA 1 μl ddH2O 22 μl PCR程序： 94℃預變性3min，94℃變性45s，50℃退火45s，72℃延伸90s，32個循環(huán)，72℃延伸10min。 PCR結(jié)果： 昨天根據(jù)蟲友的分析，我將dNTP由原來的0.5 μl改為1.5 μl 退火溫度由54度改為50度，目的條帶擴增效率很好，但是有很多非特異性擴增，請蟲友指點，小蟲不甚感激！先謝謝各位了！ [ Last edited by bear0329 on 2011-6-15 at 21:35 ] |
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5樓2011-06-17 09:38:50
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