 |
 |
 |
| 24小時(shí)熱門(mén)版塊排行榜 |
- >論壇更新日志 (2845)
- >考研 (342)
- >導(dǎo)師招生 (244)
- >蟲(chóng)友互識(shí) (175)
- >休閑灌水 (50)
- >文獻(xiàn)求助 (29)
- >碩博家園 (25)
- >考博 (21)
- >招聘信息布告欄 (20)
- >論文投稿 (12)
- >博后之家 (11)
- >綠色求助(高懸賞) (8)
- >基金申請(qǐng) (8)
- >外文書(shū)籍求助 (6)
- >教師之家 (6)
- >論文道賀祈福 (5)
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 5233 | 回復(fù): 105 | |||||
| 【獎(jiǎng)勵(lì)】 本帖被評(píng)價(jià)97次，作者lwjxz增加金幣 73.8 個(gè) | |||||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點(diǎn)擊這里查看本話題的所有回帖 | |||||
lwjxz木蟲(chóng)之王 (知名作家)
|
[資源]
現(xiàn)代藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)方法與技術(shù)簡(jiǎn)介
|
||||
|
分子生物技術(shù)在藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)中應(yīng)用較為廣泛，包括核酸分子探針的標(biāo)記、核酸分子雜交、多聚酶鏈反應(yīng)、蛋白印跡雜交技術(shù)、cDNA文庫(kù)、隨機(jī)分子庫(kù)技術(shù)、外核基因在真核細(xì)胞中的表達(dá)、轉(zhuǎn)基因動(dòng)物、人類(lèi)基因治療等�，F(xiàn)將更為常用的技術(shù)介紹如下： 一、核酸分子探針的標(biāo)記 標(biāo)記核酸分子探針（nucleic acid probe）是進(jìn)行核雜交的基礎(chǔ)，根據(jù)核酸分子探針的來(lái)源及性質(zhì)進(jìn)行選擇，選擇的基本原則是具有高度的特異性，探針選擇直接影響雜交結(jié)果的分析。根據(jù)檢測(cè)對(duì)象和目的不同，，可選擇不同的探針?lè)N類(lèi)及標(biāo)記方法。 ㈠ 探針?lè)N類(lèi) 1．基因組DNA探針 是克隆化的各種基因片斷，也是最常用的核酸探針，探針應(yīng)盡可能選用基因編碼（外顯子），避免使用內(nèi)含子及其它非編碼序列。 2．cDNA探針 與mRNA互補(bǔ)的DNA鏈稱cDNA，是一種較為理想的核酸探針，特異性較高。 3．RNA探針 RNA與RNA或DNA雜交體的探針?lè)�(wěn)定性，特異性高。 4．寡核苷酸探針 人工合成寡核苷酸片段做探針，可根據(jù)需要合成相應(yīng)序列。 ㈡ 標(biāo)記物 常用的探針標(biāo)記物有兩類(lèi)：放射性同位素和非放射性同位素。標(biāo)記物的檢測(cè)具有高度靈敏性和特異性。標(biāo)記和探針結(jié)合不影響雜交的特異性和穩(wěn)定性。其中放射性同位素是應(yīng)用最多的探針標(biāo)記物，但易造成放射性污染，多數(shù)同位素的半衰期短，不能長(zhǎng)期存放。常用的放射性同位素有32P¸3P¸35S，有時(shí)也用14C,125I或131I。 二、核酸分子雜交（nucleic acid hybridiazation ） 是指具有一定同源序列的兩條核酸單鏈在一定的條件下，按堿基互補(bǔ)配對(duì)原則形成異質(zhì)雙鏈的過(guò)程。核酸分子雜交是分子生物學(xué)領(lǐng)域應(yīng)用最廣泛的技術(shù)，靈敏度高、特異性強(qiáng)，主要用于特異DNA或RNA的定性定量檢測(cè)。 三、聚合酶鏈反應(yīng)（polymerase chain reaction，PCR）是一種體外酶促擴(kuò)增特異DNA片段的方法。傳統(tǒng)的DNA擴(kuò)增法是分子克隆法，需經(jīng)過(guò)DNA酶切、鏈接、轉(zhuǎn)化等步驟構(gòu)建含有目的基因的載體。然后導(dǎo)入細(xì)胞中進(jìn)行擴(kuò)增，再用同位素標(biāo)記的探針進(jìn)行篩選，操作復(fù)雜，耗時(shí)。PCR技術(shù)靈敏度高，特異性強(qiáng)，操作簡(jiǎn)便。PCR是本世紀(jì)分子生物學(xué)研究領(lǐng)域中最重要的發(fā)明之一。 四、cDNA文庫(kù) 是指以mRNA為模板，在反轉(zhuǎn)錄酶的作用下形成的互補(bǔ) DNA（complementary DNA,cDNA）。cDNA文庫(kù)是指一群含重組DNA細(xì)菌或嗜菌體克隆。每一個(gè)克隆只含一種mRNA的信息，足夠數(shù)目克隆的總和則含細(xì)胞的全部mRNA信息，此種克隆群體叫cDNA文庫(kù)。 五．隨機(jī)分子庫(kù)技術(shù)（random moleculer library） 采用不同技術(shù)手段和在不同的分子水平有效地實(shí)現(xiàn)分子的多樣性。其技術(shù)路線，一是利用化學(xué)合成的方法生成已知結(jié)構(gòu)的化合物，以某種特定方式和一定規(guī)律組合在一起，只要確定某一化合物具有活性，即可根據(jù)建庫(kù)的組合方式確定其結(jié)構(gòu)，圍繞此技術(shù)發(fā)展的隨機(jī)分子庫(kù)總稱為化學(xué)合成庫(kù)（synthetic chemical library）。二是利用基因工程方法直接合成的DNA或RNA的核酸庫(kù)（nucleic acid library ）,由DNA隨即編碼表達(dá)的小分子和大分子的混合群體而表達(dá)物的表面顯露又提供了可從龐大的復(fù)雜的群體中快速篩選到目的物，這就是近幾年發(fā)展起來(lái)的極富有應(yīng)用潛力的核酸編碼分子肽庫(kù)（oligonucleotide-encoded peptide library ）。 六．真核基因的表達(dá)調(diào)控技術(shù) 真核細(xì)胞具有比原核細(xì)胞更為龐大的和復(fù)雜的基因組。高等真核細(xì)胞基因組編碼成千上萬(wàn)個(gè)基因，基因內(nèi)遺傳信息從DNA到蛋白質(zhì)的傳遞過(guò)程，即基因表達(dá)過(guò)程受不同層次調(diào)節(jié)機(jī)制精密調(diào)控，此調(diào)控既決定著基因表達(dá)的量，又決定基因表達(dá)的時(shí)空順序。調(diào)控過(guò)程精密復(fù)雜，涉及到轉(zhuǎn)錄前染色質(zhì)的活化；轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)節(jié)；轉(zhuǎn)錄后的加工；翻譯水平的調(diào)節(jié)及翻譯后的修飾等�；虮磉_(dá)的調(diào)控主要發(fā)生在轉(zhuǎn)錄水平。 七．轉(zhuǎn)基因動(dòng)物 是用實(shí)驗(yàn)方法導(dǎo)入的外源基因在其染色體基因組內(nèi)穩(wěn)定整合并能遺傳給后代的一類(lèi)動(dòng)物。此種方法可建立轉(zhuǎn)基因動(dòng)物模型，以研究外源基因在整體動(dòng)物中的表達(dá)調(diào)控率；能改變動(dòng)物基因使其表現(xiàn)更符合人類(lèi)需要；也可用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物產(chǎn)生人類(lèi)所需要的生物活性物質(zhì)。 ～～～～～～ ～～～～～～ 下載：http://ishare.iask.sina.com.cn/f/16503830.html |
回復(fù)此樓» 收錄本帖的淘帖專輯推薦
 萬(wàn)卷閣 | 玉冰靈載集 | 收藏 |
» 猜你喜歡
理學(xué)07化學(xué) 303求調(diào)劑
已經(jīng)有15人回復(fù)
-
一志愿346上海大學(xué)生物學(xué)
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
一志愿北京科技，085601總分305求調(diào)劑
已經(jīng)有11人回復(fù)
-
366求調(diào)劑一志愿東北大學(xué)
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
材料求調(diào)劑
已經(jīng)有12人回復(fù)
-
08生物與醫(yī)藥專碩初試346找調(diào)劑
已經(jīng)有7人回復(fù)
-
309求調(diào)劑
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
一志愿安徽大學(xué)計(jì)算機(jī)科學(xué)與技術(shù)學(xué)碩，331分求調(diào)劑
已經(jīng)有5人回復(fù)
-
085600，材料與化工321分調(diào)劑
已經(jīng)有8人回復(fù)
-
270調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
» 本主題相關(guān)商家推薦: (我也要在這里推廣)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:
- 藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)
已經(jīng)有27人回復(fù)
- 【分享】聚合酶鏈反應(yīng)（PCR)技術(shù) 動(dòng)畫(huà)
已經(jīng)有123人回復(fù)
- 分子生物學(xué)常用實(shí)驗(yàn)技術(shù)
已經(jīng)有277人回復(fù)
- 請(qǐng)問(wèn)原核細(xì)菌蛋白能否在真核細(xì)胞中表達(dá)？
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 目的基因的導(dǎo)入
已經(jīng)有19人回復(fù)
- [文書(shū)寫(xiě)作培訓(xùn)資料]現(xiàn)代企業(yè)文書(shū)寫(xiě)作【轉(zhuǎn)載】
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 14C同位素實(shí)驗(yàn)
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 現(xiàn)代分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)
已經(jīng)有324人回復(fù)
- 生態(tài)學(xué)野外調(diào)查方法與數(shù)據(jù)處理簡(jiǎn)介.pdf
已經(jīng)有223人回復(fù)
- 現(xiàn)代植物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)指南（中國(guó)科學(xué)院上海植物生理研究所 上海市植物生理學(xué)會(huì) 編）
已經(jīng)有185人回復(fù)
- 【求助】一個(gè)非常簡(jiǎn)單的藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 【交流】哪本實(shí)驗(yàn)藥理學(xué)書(shū)好
已經(jīng)有3人回復(fù)
4樓2011-06-30 12:19:42
簡(jiǎn)單回復(fù)
小鹿撞心頭2樓
2011-06-27 15:13
回復(fù)
五星好評(píng) 感謝分享！
2011-06-28 16:29
回復(fù)
五星好評(píng) 頂一下，感謝分享！
文初5樓
2011-06-30 13:24
回復(fù)
五星好評(píng) 頂一下，感謝分享！
蓋人榮6樓
2011-07-14 22:43
回復(fù)
五星好評(píng) 頂一下，感謝分享！
2011-07-15 10:36
回復(fù)
五星好評(píng) 頂一下，感謝分享！
zyy45818樓
2011-07-16 08:36
回復(fù)
五星好評(píng) 頂一下，感謝分享！
2011-07-24 18:29
回復(fù)
三星好評(píng) 頂一下，感謝分享！
ssvke11樓
2011-09-07 13:21
回復(fù)
五星好評(píng) 頂一下，感謝分享！
kiloqk12樓
2011-09-29 10:21
回復(fù)
五星好評(píng) 頂一下，感謝分享！
li_xd200513樓
2011-09-29 11:20
回復(fù)
三星好評(píng) 頂一下，感謝分享！
2011-10-11 11:47
回復(fù)
五星好評(píng) 頂一下，感謝分享！
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 085600 295分求調(diào)劑 +15 | W55j 2026-03-30 | 18/900 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 11408 321分求調(diào)劑 +3 | huchun12138 2026-03-30 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 275求調(diào)劑 +12 | waltzh 2026-04-01 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑推薦 材料 304 +21 | 荷包蛋hyj 2026-03-26 | 21/1050 |
|
|
|
[考研] 材料科學(xué)與工程339求調(diào)劑 +11 | hyz0119 2026-03-31 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 314求調(diào)劑 +4 | 溪云珂 2026-03-26 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 350求調(diào)劑 +7 | 阿佳～ 2026-03-31 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 085600，材料與化工321分，求調(diào)劑 +11 | 大饞小子 2026-03-27 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 安徽大學(xué)專碩生物與醫(yī)藥專業(yè)(086000)324分，英語(yǔ)已過(guò)四六級(jí)，六級(jí)521，求調(diào)劑 +10 | 美味可樂(lè)雞翅 2026-03-26 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 考研材料工程351分調(diào)劑 +5 | 整個(gè)好的 2026-03-31 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑：085600材料與化工，考材科基，總分319 +17 | 678lucky 2026-03-31 | 21/1050 |
|
|
|
[考研] 求化學(xué)調(diào)劑 +12 | wulanna 2026-03-28 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 266分，求材料冶金能源化工等調(diào)劑 +8 | 哇呼哼呼哼 2026-03-27 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 一志愿西電085401數(shù)一英一299求調(diào)劑 六級(jí)521 +4 | 愛(ài)吃大鴨梨 2026-03-31 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 293分求調(diào)劑，外語(yǔ)為俄語(yǔ) +5 | 加一一九 2026-03-31 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 323分 食品與營(yíng)養(yǎng)調(diào)劑 +3 | 嘿ooo 2026-03-31 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 284求調(diào)劑 +14 | junqihahaha 2026-03-26 | 15/750 |
|
|
|
[考研] 283求調(diào)劑（080500） +14 | A child 2026-03-27 | 14/700 |
|
|
|
[考研] 331環(huán)境科學(xué)與工程求調(diào)劑 +3 | 熠然好運(yùn)氣 2026-03-27 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 081200-11408-276學(xué)碩求調(diào)劑 +4 | 崔wj 2026-03-26 | 4/200 |
|