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zhinuo1001銀蟲 (小有名氣)
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[求助]
求解：qPCR & RT-qPCR 的區(qū)別
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近日 在看做熒光定量的相關(guān)文獻(xiàn) 遇到一個(gè)概念上的問題 求各位高人指點(diǎn)下啊 qPCR：the abbreviation for quantitative real-time PCR RT-qPCR: the abbreviation for reverse transcript-qPCR 可RT-qPCR這個(gè)跟qPCR有什么區(qū)別呢？ qPCR這個(gè)是不是我們常說的RT-PCR？ qPCR不是一樣要反轉(zhuǎn)才能做的嘛 還是直接用DNA模板做的？ 還是RT-qPCR才是我們常說的RT-PCR？ 看得我很懵啊 For HELP~~~ 先謝謝啦~~~ |
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wuzuobin125
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5樓2011-06-23 00:42:17
西瓜
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【答案】應(yīng)助回帖
zhinuo1001(金幣+5): good~ 2011-06-22 22:36:27
zhinuo1001(金幣+2): 還有兩金幣……都發(fā)完吧 2011-06-22 22:41:23
zhinuo1001(金幣+2): 還有兩金幣……都發(fā)完吧 2011-06-22 22:41:23
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雖然Real-time PCR（實(shí)時(shí)熒光定量PCR）和Reverse transcription PCR（反轉(zhuǎn)錄PCR）看起來都可以縮寫為RT-PCR，但是，國際上的約定俗成的是：RT-PCR特指反轉(zhuǎn)錄PCR，而Real-time PCR一般縮寫為qPCR（quantitative real-time PCR）。 更正樓主的觀點(diǎn)：qPCR不一定與反轉(zhuǎn)錄相關(guān)，除了可以用cDNA作為模板，也可以用基因組DNA等作為模板。而反轉(zhuǎn)錄PCR也不一定非要與熒光定量相關(guān)，從mRNA中反轉(zhuǎn)錄得到cDNA，然后PCR擴(kuò)增出目的基因，這也是反轉(zhuǎn)錄PCR。 綜上，那RT-qPCR（也有人寫成qRT-PCR）就很好理解了，就是結(jié)合了熒光定量技術(shù)的反轉(zhuǎn)錄PCR：先從RNA反轉(zhuǎn)錄得到cDNA（RT），然后用Real-time PCR進(jìn)行定量分析（qPCR）。 有興趣的話可以看看維基百科：http://en.wikipedia.org/wiki/Rev ... rase_chain_reaction Reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) is a variant of polymerase chain reaction (PCR), a laboratory technique commonly used in molecular biology to generate many copies of a DNA sequence, a process termed "amplification". In RT-PCR, however, an RNA strand is first reverse transcribed into its DNA complement (complementary DNA, or cDNA) using the enzyme reverse transcriptase, and the resulting cDNA is amplified using traditional PCR or real-time PCR. Reverse transcription PCR is not to be confused with real-time polymerase chain reaction (Q-PCR/qRT-PCR), which is also sometimes abbreviated as RT-PCR. |
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2樓2011-06-22 21:36:26
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4樓2011-06-22 23:26:51
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