| 2 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 2987 | 回復: 6 | ||||
| 本帖產生 1 個 BioEPI ,點擊這里進行查看 | ||||
| 當前只顯示滿足指定條件的回帖,點擊這里查看本話題的所有回帖 | ||||
[交流]
硫酸銨沉淀后透析,里面的沉淀是什么?
|
||||
| 我覺得是透析后,銨根離子的減少,使透析袋里溶液的pH改變,使蛋白發(fā)生沉淀,但我覺得,還是應該保留的,有些人說要離心,把沉淀去掉,請問大家, 為什么呢? |
» 搶金幣啦!回帖就可以得到:
+1/184
+2/134
+1/71
+1/31
+1/18
+1/16
+1/14
+1/14
+1/11
+1/9
+1/6
+1/6
+1/6
+1/5
+1/4
+1/4
+1/3
+1/2
+1/2
+1/1
專家顧問 (知名作家)
![]() |
專家經驗: +248 |
|
硫酸銨沉淀的時候應該要注意pH值的變化,就我的實驗來說,一株產淀粉酶曲霉固態(tài)發(fā)酵之后用超純水浸泡離心,得到含有酶的上清液的pH值為6.5,但是淀粉酶能耐受pH4.5,為了去除更多雜質蛋白質,我把硫酸銨濃度調節(jié)到2摩爾每升的同時會控制pH值為4.5,4度過夜之后離心取上清液再調節(jié)到pH值7.0,4度放置,離心,又去除一部分雜質蛋白質,上清液直接用pH7.0的疏水層析系統來純化。 一個纖維素酶的純化我也用類似的方法,只不過第一步是用4.0。 硫酸銨是酸式鹽,2M時pH值約為5,4M時更低,用來沉淀蛋白質的時候情況就更復雜了,所以最好知道自己需要的蛋白質的耐受情況,不要搞死了。 透析之前要選用一個不影響自己想要的蛋白質的pH值,硫酸銨沉淀和透析都要保持一致,才能使損失減少。透析時候產生的沉淀不知道是不是你想要的蛋白質,不過下次做最好謹慎一點,做我說過的預備實驗。 |
| 2 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 0854電子信息求調劑 +6 | α____ 2026-03-22 | 7/350 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 收08調劑生 +6 | komorebi69 2026-03-18 | 6/300 |
|
|
[考研] 招08考數學 +7 | laoshidan 2026-03-20 | 16/800 |
|
|
[考研] 305分求調劑(食品工程) +5 | Sxy112 2026-03-21 | 7/350 |
|
|
[考研]
|
13659058978 2026-03-24 | 4/200 |
|
|
[考研] 材料與化工328分調劑 +4 | 。,。,。,。i 2026-03-23 | 4/200 |
|
|
[考研] 材料專碩英一數二306 +8 | z1z2z3879 2026-03-18 | 8/400 |
|
|
[考研] 一志愿重慶大學085700資源與環(huán)境,總分308求調劑 +7 | 墨墨漠 2026-03-23 | 8/400 |
|
|
[考研]
求調劑材料學碩080500,總分289分
5+3
|
@taotao 2026-03-19 | 21/1050 |
|
|
[考研] 材料與化工085600,總分304,本科有兩篇sci參與,求調劑 +4 | 幸運的醬醬 2026-03-22 | 5/250 |
|
|
[考研] 308求調劑 +3 | 墨墨漠 2026-03-21 | 3/150 |
|
|
[考研] 生物學調劑 +5 | Surekei 2026-03-21 | 5/250 |
|
|
[考研] 085601調劑 358分 +3 | zzzzggh 2026-03-20 | 4/200 |
|
|
[考研] 22408 344分 求調劑 一志愿 華電計算機技術 +4 | solanXXX 2026-03-20 | 4/200 |
|
|
[考研] 中南大學化學學碩337求調劑 +3 | niko- 2026-03-19 | 6/300 |
|
|
[考研] 求調劑一志愿南京航空航天大學289分 +3 | @taotao 2026-03-19 | 3/150 |
|
|
[考研] A區(qū)線材料學調劑 +5 | 周周無極 2026-03-20 | 5/250 |
|
|
[考研] 一志愿西南交通 專碩 材料355 本科雙非 求調劑 +5 | 西南交通專材355 2026-03-19 | 5/250 |
|
|
[考研] 0856調劑,是學校就去 +8 | sllhht 2026-03-19 | 9/450 |
|
|
[考研] 【同濟軟件】軟件(085405)考研求調劑 +3 | 2026eternal 2026-03-18 | 3/150 |
|