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icyray新蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
求助DNA檢測(cè)的問(wèn)題
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我本身是做微納加工的，最近的課題要做生物DNA檢測(cè)芯片，但是DNA檢測(cè)完全不懂，特來(lái)請(qǐng)教… 芯片已經(jīng)做好，表面是金材料，需要的是以一個(gè)DNA片段其中的一個(gè)鏈作為標(biāo)記物，固定在金上，然后將被檢測(cè)溶液滴在芯片上，檢測(cè)其中是否含有同樣DNA片段的另一個(gè)匹配的鏈的部分。不知道這樣說(shuō)清楚了沒(méi)。。。 問(wèn)題： 1. 我需要向生物制劑公司購(gòu)買(mǎi)DNA產(chǎn)品，應(yīng)該買(mǎi)什么？ 2. 被檢測(cè)溶液中本身是完整的DNA片段，怎么將左右兩半分開(kāi)，用于檢測(cè)？ 沒(méi)什么金幣，完全門(mén)外漢，希望高人解惑，謝謝先！ |
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 【分子生物】EPI帖 | DNA RNA |
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【答案】應(yīng)助回帖
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amisking(金幣+3, EPI+1): 鼓勵(lì)應(yīng)助 2011-06-27 19:55:58
icyray(金幣+5): 謝謝！ 2011-06-30 14:49:53
amisking(金幣+3, EPI+1): 鼓勵(lì)應(yīng)助 2011-06-27 19:55:58
icyray(金幣+5): 謝謝！ 2011-06-30 14:49:53
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1. 我需要向生物制劑公司購(gòu)買(mǎi)DNA產(chǎn)品，應(yīng)該買(mǎi)什么？——應(yīng)該是針對(duì)特定材料的芯片吧 那就用特定材料的DNA啰 2. 被檢測(cè)溶液中本身是完整的DNA片段，怎么將左右兩半分開(kāi)，用于檢測(cè)？——這個(gè)簡(jiǎn)單 讓DNA變性 解鏈成單鏈 就行了吧 拙見(jiàn) |
2樓2011-06-27 19:41:08
beautybanana
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【答案】應(yīng)助回帖
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可以參照?qǐng)D片3上參考文獻(xiàn)把文章下下來(lái)，今天網(wǎng)速超慢就不能幫你下了，一般的是把被檢測(cè)的物質(zhì)（溶液）加到含有引物的芯片上去，做microPCR，有與引物互補(bǔ)模板的話(huà)將會(huì)被擴(kuò)增出來(lái)，即可以被檢測(cè)，否則即無(wú)，這里涉及到的也有寡核苷酸的固定化，也就是說(shuō)通過(guò)納米金將寡核苷酸（Oligonucleotide)固定到芯片的表面，能夠與之互補(bǔ)的鏈將會(huì)與之形成互補(bǔ)鏈（模板的DNA通過(guò)一定的溫度解鏈后然后再降低溫度就可以與互補(bǔ)的寡核苷酸結(jié)合）再通過(guò)microPCR檢測(cè)出來(lái)。 |
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icyray3樓2011-06-27 20:32:38
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【答案】應(yīng)助回帖
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西瓜(金幣+6, EPI+1): 一并獎(jiǎng)勵(lì)！ 2011-06-28 18:19:55
西瓜(金幣+6, EPI+1): 一并獎(jiǎng)勵(lì)！ 2011-06-28 18:19:55
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更正下：剛才說(shuō)的有點(diǎn)不對(duì)，是看圖1，是寡核苷酸固定到芯片上的，然后是金顆粒吸附溶液中的被檢測(cè)的DNA，通過(guò)變性（高溫）-復(fù)性（也可以是變性劑），與固定在芯片表面的寡核苷酸互補(bǔ)的納米金表面上的DNA能夠結(jié)合在一起，達(dá)到檢測(cè)的目的，寡核苷酸的序列是怎樣的要根據(jù)所要檢測(cè)的DNA上的序列來(lái)確定，寡核苷酸與DNA（互補(bǔ)的單鏈）結(jié)合以后，可以通過(guò)microPCR(就是反應(yīng)體系很微量的PCR反應(yīng)體系）進(jìn)行擴(kuò)增檢測(cè)或是通過(guò)其他方式檢測(cè). |
4樓2011-06-27 20:41:03
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