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[求助]
向各位大神請(qǐng)教一個(gè)簡(jiǎn)單的問(wèn)題,希望大牛不吝賜教
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| 假設(shè),在工作中,偶然發(fā)現(xiàn)一種蛋白,這種蛋白免疫性很好,但是我不知道這個(gè)蛋白的序列,也不知道這個(gè)蛋白的名稱(chēng),現(xiàn)在我想知道用什么方式才能知道這個(gè)蛋白的名稱(chēng)或者序列,并用什么方式才能反推出這個(gè)蛋白對(duì)應(yīng)的基因序列,并利用這個(gè)序列設(shè)計(jì)引物,進(jìn)而克隆,擴(kuò)增,之后轉(zhuǎn)到質(zhì)粒,擴(kuò)增蛋白,希望能有人幫我詳細(xì)的講解一下 |
【分子生物】EPI帖 |

至尊木蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)
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首先,即使知道蛋白序列也是推不出基因序列的,氨基酸和核苷酸之間是一對(duì)多的關(guān)系,因?yàn)橐粋(gè)氨基酸有多個(gè)密碼子可以編碼。 根據(jù)你蛋白的性質(zhì)查文獻(xiàn),看看有沒(méi)有人報(bào)道過(guò)相關(guān)蛋白,從而得到一些信息。 如果查不到相關(guān)信息,但你說(shuō)的東西基本可以做,基本過(guò)程如下:先純化出該蛋白,然后進(jìn)行蛋白質(zhì)N端測(cè)序和肽譜圖分析,根據(jù)這些信息設(shè)計(jì)兼并引物,擴(kuò)增出部分基因片段,然后RACE獲得全長(zhǎng)基因(如果能N端測(cè)序和C端測(cè)序都進(jìn)行最好,就可以設(shè)計(jì)引物獲得全長(zhǎng)基因)。 |
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